德國Minerva公司生產(chǎn)的Mynox支原體祛除劑是市面上惟一的支原體殺除劑,而其他牌子的支原體清除劑只是對支原體產(chǎn)生抑制作用,并無(wú)殺滅效果,因此作用很慢。本文締一生物/締一生物為您分析使用Mynox殺支原體應注意什么?
Mynox起效時(shí)間卻只有2-3個(gè)小時(shí)。但在使用Mynox過(guò)程中,還需要注意一些問(wèn)題,以保證zui大的使用效果。
1、Mynox加入的細胞量要控制。Mynox每管200?l,是加入到2ml包含1x104- 1x105細胞的培養液中。
2、細胞要注意打散為單細胞,不要讓細胞成團。因為Mynox需要與支原體直接接觸才能發(fā)揮效力。細胞成團容易造成細胞間隙,從而成為支原體的藏身之所。
3、Mynox與支原體污染的細胞的混合2個(gè)小時(shí),即能完成支原體的殺滅。這時(shí)應換新鮮的培養基繼續培養,不必再用Mynox。但這時(shí)不應馬上用PCR檢測支原體,因支原體雖然死亡,但培養液中還游離很多支原體DNA。應等傳代三至四次后,再進(jìn)行檢測。
4、如果想延長(cháng)Mynox作用時(shí)間至數天(細胞一代時(shí)間),期間應觀(guān)察細胞狀態(tài)。必要時(shí)換為標準培養基,或將Mynox與培養基按1:5稀釋培養。
5、如果使用Mynox?消除污染細胞中的支原體,胎牛血清的*濃度為5%。過(guò)高濃度的血清會(huì )影響Mynox消除支原體的效果。如果使用Mynox消除病毒中的支原體,建議使用無(wú)血清的培養基。
6、包被病毒外層的脂質(zhì)膜成分與支原體膜相似,也是Mynox結合的對象。根據使用Mynox?的濃度和作用時(shí)間,這些病毒極易被Mynox殺除。為了能夠*殺除支原體同時(shí)保證病毒的繼續培養,起始病毒滴度應高于106TCID50。
另外,或許有人疑問(wèn),Mynox只能殺滅細胞外的支原體,而對細胞內的支原體不起作用。這里需要澄清一下。事實(shí)上,細胞培養中產(chǎn)生的支原體污染就是細胞外的污染。只有一種支原體能進(jìn)入到細胞內,就是Mycoplasma penetrans,但它并不污染體外培養的細胞。
綜上所述,您是不是已經(jīng)對使用Mynox殺支原體應注意什么,有所了解。如果還有其他疑問(wèn),請咨詢(xún)締一生物/締一生物資深專(zhuān)家。