雜交瘤培養基推薦使用方法

雖然，雜交瘤細胞的生長(cháng)依賴(lài)于外源性營(yíng)養物質(zhì)的補充，如：血清、白蛋白、水解產(chǎn)物、蛋白質(zhì)等，但是，仍可應用化學(xué)合成的TurboDoma培養基進(jìn)行細胞培養?？傊?，你目前使用的培養基中營(yíng)養補充成分越少，細胞從這種蛋白依賴(lài)型培養基過(guò)渡到適應TurboDoma*無(wú)蛋白培養基的速度就會(huì )越快。本文締一生物/締一生物為您來(lái)分析雜交瘤培養基推薦使用方法。

1.通過(guò)離心過(guò)濾（380轉，3分鐘）采集細胞后，加入TurboDoma培養基，使細胞能夠再次懸浮，且細胞密度應達到1 x 105/ml，如：將2 x 106 細胞接種在75 cm2細胞培養瓶中，加入20 ml TurboDoma培養基。如果，培養基的pH值低于支持細胞生長(cháng)的范圍，即pH值< 7.0，培養基的顏色從橘紅變?yōu)榈S，這時(shí)，需另加入20 ml新鮮培養基，使培養基體積增大一倍。上述情況通常在接種后3-4天出現。

2.注意觀(guān)察細胞生長(cháng)時(shí)的狀態(tài)。細胞培養4-5天內，由于細胞內蛋白質(zhì)的丟失，會(huì )導致大量細胞的死亡。但是，仍有一些代謝活躍的細胞能夠很快適應新的生長(cháng)環(huán)境。

3.正在生長(cháng)的細胞由于乳酸的產(chǎn)生會(huì )引起pH值的下降。當培養基的pH值低于支持細胞生長(cháng)的范圍時(shí)，倒出50%的培養基，然后，再加入50%新鮮的培養基，繼續進(jìn)行培養。如果更換培養基的間隔時(shí)間越來(lái)越短，例如：細胞表現出旺盛的代謝能力，那么，就可增加新鮮培養基的量，直至將剩余的培養基全部換為新的培養基。

4.為了細胞增殖能夠達到滿(mǎn)意的效果，必須保證培養過(guò)程中使用相同的培養瓶。而且，我們建議：在細胞適應TurboDoma培養基的過(guò)程中，要頻繁地更換培養液，不要急于傳代。細胞需要逐漸適應新的培養環(huán)境。

5.懸浮細胞生長(cháng)時(shí)，zui初，可能會(huì )形成50個(gè)細胞左右的細胞團，大小不一。漸漸地，細胞團慢慢消失，細胞逐漸擴散增殖。對于懸浮細胞的傳代培養，可通過(guò)稀釋培養液或加入新鮮培養基來(lái)進(jìn)行。

注意：細胞培養過(guò)程中，為了能夠使細胞在24小時(shí)內進(jìn)入正常生長(cháng)周期，必須等細胞生長(cháng)密度達到一定程度時(shí)才可分瓶，進(jìn)行傳代培養！

綜上所述，您是不是已經(jīng)對雜交瘤培養基推薦使用方法，有所了解。如果還有其他疑問(wèn)，請咨詢(xún)締一生物/締一生物資深專(zhuān)家。