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提起細胞培養中，牛血清的融化，大家首先想到的就是4℃過(guò)夜法。
今天小威把上流行多年的『血清融化三步法』介紹給大家，讓你知道怎樣讓你的血清，通過(guò)合適的融化，事半功倍！
與4℃過(guò)夜法相比
三步法為什么對血清更好呢？
重點(diǎn)有二！
其一：關(guān)系到沉淀出現的幾率！
記得嗎？血清在融化過(guò)程中，瓶子里冰塊的底部你會(huì )看見(jiàn)亮亮的蛋白絲在下沉，如同蜂蜜溶于水時(shí)的亮線(xiàn)，這就是血清中大量的蛋白在快速融化，而水的熔點(diǎn)高于蛋白，融化的速度是比蛋白慢的。（回想一下冰淇淋和大棒冰的區別，你懂得?。?/p>
試想，如果采用4℃過(guò)夜的方法，1瓶500毫升的血清融化好，大約需要10小時(shí)左右，蛋白先融化，沉降在瓶子的底部，水融化的速度比蛋白慢，于是造成大量蛋白溶于少量的水，此時(shí)就很容易有一些蛋白飽和析出，（大多是脂蛋白和纖連蛋白），這就是血清融化中產(chǎn)生沉淀的重要原因之一。
采用三步法，只要2.5個(gè)小時(shí)，溫和有效地加快了水融化的速度，另一方面，融化過(guò)程中可以間斷輕輕搖擺瓶子，讓蛋白在瓶中混勻。
此方法不但節約了時(shí)間，而且zui大限度減少了血清沉淀出現的幾率。
其二：血清在培養細胞中，zui重要的是利用它的活性的因子，因此，融化過(guò)程中zui大限度地保留因子的活性，就變得非常重要。
回憶一下，細胞復蘇時(shí)，要保持細胞的活性，我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢？
快融！
血清同樣如此！
三步法需要兩個(gè)半小時(shí)，
4℃過(guò)夜需要大約10個(gè)小時(shí)（冰箱一般設2-8℃，所以各實(shí)驗室融化時(shí)間會(huì )稍有出入）。
哪個(gè)速度對保留活性更好？不言而喻！
三步法詳細解讀
下面，我們詳細解讀『血清的三步融化法』的步驟：
圖：剛從-28℃拿出的血清，是這個(gè)樣子的
融化血清*步
溫度：室溫
時(shí)間：100ml - 35分鐘
500ml - 90分鐘
1000ml - 100分鐘
或
溫度：15-20℃水?。ㄐ陆拥淖詠?lái)水24℃上下）
時(shí)間：100ml - 5分鐘
500ml - 18分鐘
1000ml - 20分鐘
圖：這是zui近Ausbian血清的大區周博，在天津血研所實(shí)驗室拍到的——實(shí)驗人員三步法化血清的圖片，為了節約時(shí)間，實(shí)驗人員采取的是*步20℃水浴18min的方法。（用現接的自來(lái)水放入冰凍的血清，即可達到20℃水浴的效果。一般實(shí)驗室沒(méi)有能制冷到20℃的水浴鍋）
融化血清第二步
溫度：20℃水?。ㄐ陆拥淖詠?lái)水24℃上下）
時(shí)間：100ml - 15分鐘
500ml - 25分鐘
1000ml - 30分鐘
圖：第二步，仍舊是新接的自來(lái)水浴，25min
融化血清第三步
溫度：37℃水浴
時(shí)間：100ml - 20分鐘
500ml - 35分鐘
1000ml - 45分鐘
圖：大家看，使用三步法融化的血清十分清亮，養細胞的效果也是棒棒噠。
注意
1.在水浴過(guò)程中，血清的平面要*浸在水中。在融化過(guò)程中要慢慢搖動(dòng)，使血清混勻，但不要產(chǎn)生泡沫!
2.胎牛血清不推薦熱滅活。
3.此三步法適用于所有品牌、所有級別的進(jìn)口或國產(chǎn)血清，均可讓血清在減少沉淀、保留活性、提高細胞培養效果方面，得到不同程度的提高！
看到這里，你是不是迫不及待的想試試融化血清的三步法了呢？
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上海締一生物生物科技創(chuàng )辦于2003年。
持續為國家重大科研項目提供高品質(zhì)細胞培養用進(jìn)口血清、培養基。
為實(shí)驗室提供支原體預防和祛除的完整解決方案，
為生產(chǎn)、科研提供一線(xiàn)無(wú)動(dòng)物源性微生物培養基、蛋白胨、蛋白水解物產(chǎn)品。
十四年來(lái)，被生物界譽(yù)為值得“持續信賴(lài)的供貨商”。
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