細胞培養新手必讀！

　　在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí)，細胞培養作為一項基本的研究方法，經(jīng)常會(huì )被用到?？杉毎囵B到底是什么樣的過(guò)程呢？下面是我們的實(shí)驗員培養細胞的心得體會(huì )：一養細胞深似海，從此自由是路人。開(kāi)始養細胞之前就要做好隨時(shí)照顧它的心理準備，三天打魚(yú)兩天曬網(wǎng)不僅無(wú)法養出狀態(tài)的細胞，還有可能讓嬌貴的細胞寶寶全軍覆沒(méi)，那么，怎么才能培養出符合條件的細胞呢？

　　1、選擇正確的培養基

　　在養細胞之前，就要了解，你所養細胞的來(lái)源以及種類(lèi)和名稱(chēng)，查閱一定量的文獻，確定所需培養液種類(lèi)以及是否需要添加特殊成分，常用的細胞培養液有DMEM、RPMI1640、F12等等，一些常見(jiàn)的細胞基本可以使用這幾種培養基中的一種來(lái)培養，有的需要加入一定其他成分，這需要根據不同的細胞類(lèi)型，查ATCC細胞庫或者查文獻，才能找到所需*培養液。選擇正確的培養液是養好細胞的*步。

　　2、了解細胞的生長(cháng)習性

　　不同的細胞生長(cháng)習性不同。如成纖維細胞是貼壁生長(cháng)，有一定的密度依賴(lài)性，密度小可能會(huì )出現不增殖，狀態(tài)差的情況，接種密度大時(shí)則需要隔天傳代，頻繁傳代則影響細胞狀態(tài)；再如RPMI-8226人多發(fā)性骨髓瘤細胞，是懸浮生長(cháng)的，傳代需離心棄去上清即可?？傊?，了解細胞生長(cháng)習性，再加上正確的計數，才能掌握好傳代的密度。

　　3、選擇的血清

　　血清中含有細胞生長(cháng)所必須的生長(cháng)因子，作為哺乳動(dòng)物細胞培養的附加物，血清的添加是十分重要的，因此，選擇的血清，是細胞養殖成功與否的關(guān)鍵！

　　4、及時(shí)傳代和更換培養液

　　在細胞增殖到一定的密度后，要及時(shí)傳代，根據細胞的生長(cháng)速度和密度，及時(shí)更換培養液。更換過(guò)勤，浪費培養液，更換不夠及時(shí)，則細胞狀態(tài)轉差，一般需隔天更換培養液，具體可根據所養細胞種類(lèi)予以調整。

　　5、的無(wú)菌意識

　　前面林林總總全部都注意好了，如果無(wú)菌意識差，細胞中混入了微生物，則千里之堤潰于蟻穴，細菌的生長(cháng)速度和破壞力，將迅速占領(lǐng)培養皿，破壞細胞結構，有些初學(xué)者會(huì )在培養液中加入1%的雙抗，但是，無(wú)菌意識不強，雙抗亦無(wú)法拯救你的細胞！

　　6、傾心的呵護，頻繁的觀(guān)察

　　做到以上幾點(diǎn)，就可以開(kāi)始養你的細胞了，但是再次重申細胞嬌弱，在養細胞的過(guò)程中，難免會(huì )出現一些意想不到的問(wèn)題，要想成功養好細胞，時(shí)時(shí)惦記它 ，頻繁地觀(guān)察，初期一天觀(guān)察2次都不足為過(guò)，出現任何預料外的情況，及時(shí)處理，才能保障收獲一盤(pán)“漂亮”的細胞。

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