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HiCynth™改良煌綠瓊脂基礎培養基

更新時(shí)間:2017-09-08  |  點(diǎn)擊率:1170

HiCynth™改良煌綠瓊脂基礎培養基,經(jīng)改良后用于選擇性分離傷寒沙門(mén)氏菌之外的沙門(mén)氏菌,樣本是糞便、食物和奶制品。

 

組成:

成分                             g/L

HiCynth™蛋白胨5號     3.000

HiCynth™蛋白胨4號     10.000

乳糖                            10.000    

蔗糖                            10.000

氯化鈉                           5.000

酚紅                              0.080

煌綠                             0.0125

瓊脂                             20.000

zui終pH值(25℃)      6.9±0.2

 

使用指導:

在1000ml蒸餾水中重懸29.05g培養基干粉。必要時(shí)加熱以*溶解。高壓滅菌(15磅121℃,15分鐘)。避免過(guò)熱。涼至45-50℃。要提高選擇性,可無(wú)菌加入1管水化的磺胺類(lèi)添加劑(#FD068),混勻后倒入無(wú)菌平板。

 

原理和說(shuō)明:

沙門(mén)氏菌引起多種類(lèi)型的感染,從輕微的自限性胃腸炎到危及生命的傷寒。zui常見(jiàn)的沙門(mén)氏菌病是自限性胃腸炎,發(fā)熱持續不到2天,腹瀉持續不到7天。

 

 

HiCynth™改良煌綠瓊脂基礎培養基為分離沙門(mén)氏菌的主要培養基,是由Kristensen等人描述1??挤蚵M(jìn)一步改進(jìn)2。美國公共衛生學(xué)會(huì )3FDA4,5也推薦使用煌綠瓊脂,歐洲藥典、英國藥典和印度藥典也描述了這一方法6,7,8。

 

 

該培養基含有煌綠,能抑制大多數革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(cháng)。傷寒沙門(mén)氏菌、志賀菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌被廣泛抑制。臨床標本可直接接種在該培養基上。但是,由于高度選擇性,推薦該培養基與其他較少抑制作用的培養基一起使用,以增加恢復率的機會(huì )。

 

 

該培養基包含有HiCynth™蛋白胨4號和HiCynth™蛋白胨5號提供必要的氮源和碳源的化合物、長(cháng)鏈氨基酸、維生素,還有其他必需的營(yíng)養成分。乳糖和葡萄糖是能量來(lái)源,它們在培養基中發(fā)酵形成酸性pH值,可被酚紅指示劑檢測到。氯化鈉維持培養基的滲透壓平衡?;途G抑制可能帶來(lái)污染的微生物菌落。當樣本懷疑有大量的競爭菌時(shí),可向該培養基添加磺胺醋酰(1g/L)和扁桃酸鈉(0.25g/L)。

 

 

非乳糖發(fā)酵菌在培養18-24小時(shí)后形成白色至粉紅色菌落。傷寒沙門(mén)氏菌和志賀菌不會(huì )在這種培養基上生長(cháng)。此外,變形桿菌、綠膿桿菌、枸櫞酸桿菌屬可能會(huì )模仿腸道菌產(chǎn)生紅色的小菌落。

 

質(zhì)量控制

外觀(guān)

淡黃色至淡粉色均一松散粉末

 

成膠性

結實(shí),相當于2.0%瓊脂糖凝膠

 

制備好的培養基顏色和透明度

在平皿中為透明棕綠色至輕微乳白色凝膠

 

pH值(25℃)

6.70-7.10

 

培養反應

30-35℃培養24-48小時(shí)?;謴吐室约毦诖蠖估业鞍姿猸傊仙L(cháng)為100%

微生物

接種量(CFU

生長(cháng)狀況

批次值(CFU)

恢復率

菌落顏色

傷寒沙門(mén)氏菌ATCC 14028

50-100

生長(cháng)旺盛

25-100

≥50%

粉白色

阿博尼沙門(mén)氏菌NCTC 6017

50-100

生長(cháng)旺盛

25-100

≥50%

粉白色

腸炎沙門(mén)氏菌ATCC13076

50-100

生長(cháng)旺盛

25-100

≥50%

粉白色

傷寒沙門(mén)氏菌ATCC 6539

50-100

生長(cháng)良好

15-40

30-40%

紅粉色

大腸桿菌ATCC 25922

50-100

基本不生長(cháng)

0-10

0-10%

黃綠色

大腸桿菌ATCC 8739

50-100

基本不生長(cháng)

0-10

0-10%

黃綠色

大腸桿菌 NCTC 9002

50-100

基本不生長(cháng)

0-10

0-10%

黃綠色

金黃葡萄球菌ATCC 25923

≥10³

抑制

0

0%

 

金黃葡萄球菌ATCC 6538

≥10³

抑制

0

0%

 

 

儲存和保質(zhì)期

30℃以下密閉保存。配好后的培養基2-8℃保存。在標簽上的截止日期前使用。

 

參考文獻:

1.  Kristensen M., Lester V, and Jurgens A., 1925,Brit.J.Exp.Pathol.,6:291.

2.  Kauffman F., 1935, Seit F. Hyg. 177:26.

3.  Downes F. P. and Ito K. (Ed), 2001, Compendiumof Methods for Microbiological Examination of Foods, 4th Ed. APHA,WashingtonD.C.

4.  Standard Methods for the MicrobiologicalExamination of Dairy Products, 1995, 19th Ed, APHA, Washington, D.C.

5.  Bacteriological Analytical Manual, 5th Ed,1978, AOAC, Washington D.C.

6.  The European Pharmacopoeia, 2014, Council orEurope, Strasbourg.

7.  The British Pharmacopoeia, 2016 vol. II,London.

8.  Indian Pharmacopoeia, 2014, Ministry of Healthand Family Welfare, Govt., of India.

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