支原體PCR檢測實(shí)驗操作樣品的收集

　　支原體PCR檢測實(shí)驗操作樣品的收集
　　
　　支原體PCR檢測實(shí)驗操作
　　
　　PCR反應的前期操作應在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行。
　　
　?。?）樣品的收集：待測細胞用抗培養基培養7d，用無(wú)菌容器取上清液500ul，4℃保存待測。
　　
　?。?）模板的制作：在無(wú)菌的條件下，取細胞培養上清100ul于一無(wú)菌的0.5ml塑料離心管內，蓋好蓋子，95℃水浴加熱5min。
　　
　?。?）打開(kāi)蓋子，向管內加StrataCleanresin10ul，蓋好蓋子，旋渦混懸器混合，離心5—10s，吸取上清至一新的塑料離心管中，模板制作完畢，4℃保存。
　　
　?。?）PCR反應：反應體系zui適條件為：10mmol/lTris-HCL（pH8.38）；50mmol/lHCL；1.5-2.5mmol/lMgCL2；200umol/ldNTP；2UDapDNA聚合酶?？偡磻w系為50ul，反應用去離子水均需用12000uw/cm2紫外燈照射。
　　
　　VenorGeM支原體污染檢測試劑盒（一步法）支原體PCR檢測試劑盒組成：
　　
　　Mix干粉（引物、dNTP、熱啟動(dòng)taq酶，內控對照），重懸緩沖液，陽(yáng)性對照DNA，Tris/EDTA緩沖液。
　　
　　特點(diǎn)：
　　
　　廣譜（包含常規26種支原體）
　　
　　靈敏度高
　　
　　特異性好
　　
　　操作簡(jiǎn)單
　　
　　便捷（整個(gè)操作不到3小時(shí)）