締一生物生物科普：關(guān)于胎牛血清知識問(wèn)答（二）

胎牛血清在細胞培養中受到很多實(shí)驗人的青睞，今天小編把關(guān)于胎牛血清的保存使用做一個(gè)整理，希望對于初次接觸細胞培養的你能夠有所裨益哦！

1、胎牛血清有必要做熱滅活嗎?  

答：實(shí)驗顯示，胎牛血清是不需要做熱滅活的。

（1）首先將胎牛血清置于50℃以上的溫度長(cháng)達30分鐘是*沒(méi)有必要的。盡管如此，有些實(shí)驗室還是把胎牛血清的熱滅活作為常規來(lái)執行。事實(shí)上， 熱滅活目的是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質(zhì)，但是在胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒(méi)有必要。（2）Triglia和Linscott曾對商業(yè)胎牛血清中的補體成分進(jìn)行測定，他們發(fā)現胎牛血清中含有的C1，C6僅達成年動(dòng)物血清的1-3%，而其它補體成分僅有成年動(dòng)物的5-50％，至于補體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。Pinyopummintr等證明血清去除滅活步驟不影響牛胚胎的發(fā)育分化。又有研究結果證實(shí)熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對細胞的促粘附作用。（3）此外，熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來(lái)負面的影響，對血清的加熱經(jīng)常導致血清中沉淀的產(chǎn)生，導致很多營(yíng)養因子的損失。因此，胎牛血清已無(wú)需再滅活。

總之，經(jīng)此處理過(guò)的血清對細胞的生長(cháng)只有微小的促進(jìn)，或*沒(méi)有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，而造成細胞生長(cháng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì )顯著(zhù)的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀(guān)察，像是“小黑點(diǎn)”，常常會(huì )讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì )使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。若非必須，可以不需要做熱處理這一步。不但節省時(shí)間，更確保血清的質(zhì)量！

2、細胞培養中出現黑點(diǎn)是污染嗎？如何處理？  

答：一旦您在細胞培養的過(guò)程中發(fā)現有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀(guān)察培養基是否混濁，然后，在鏡下觀(guān)察培養細胞生長(cháng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細胞被污染，微生物則會(huì )大量繁殖，培養基就會(huì )迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀(guān)察細胞，生長(cháng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現前相比，沒(méi)有任何變化。

那么，黑點(diǎn)的出現可能與以下幾種情況有關(guān)：（1）細胞生長(cháng)過(guò)老，破碎的細胞殘??；（2）血清質(zhì)量不好，反復凍融的結果；（3）配制培養基的pH值偏高，不宜細胞生長(cháng)；（4）配制培養基的水質(zhì)、容器不合格?？蓱秒x心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn)；（5）培養原代細胞中出現小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。 

有著(zhù)“細胞搭檔”贊譽(yù)的Ausbian胎牛血清，早已在各大實(shí)驗室悄然流行。2014年，Ausbian血清商標已在中國商標局注冊，目前此商標屬上海締一生物生物科技有限公司*所有。Ausbian血清目前在中國市場(chǎng)主要為澳洲血源的產(chǎn)品，廣泛應用于中科院、醫科院、軍科院、細胞庫、北大、清華、復旦、浙大等科研院所及大學(xué)的重點(diǎn)細胞實(shí)驗。