Vero細胞無(wú)血清培養的應用

Vero細胞是現階段病毒疫苗生產(chǎn)的主要的細胞基質(zhì)。Vero細胞無(wú)血清培養技術(shù)的應用集中體現在病毒疫苗的開(kāi)發(fā)研究和商業(yè)化生產(chǎn)中。Vero細胞無(wú)血清培養技術(shù)提高了病毒疫苗生產(chǎn)工藝的可靠性、產(chǎn)品質(zhì)量的可控性和安全性。目前，Vero細胞無(wú)血清培養已在包括狂犬病疫苗、流行性乙型腦炎疫苗、脊髓灰質(zhì)炎疫苗、流感疫苗、腎綜合征出血熱疫苗、甲型肝炎疫苗、呼腸病毒疫苗等的研發(fā)和生產(chǎn)中得到應用。

狂犬病疫苗

  狂犬病疫苗是眾多Vero細胞生產(chǎn)的疫苗中商業(yè)化為成功的病毒疫苗。應用Vero細胞無(wú)血清培養技術(shù)生產(chǎn)的狂犬疫苗在免疫原性和安全性上均已得到充分的肯定。與含血清的合成培養基相比，商業(yè)化的Vero細胞無(wú)血清培養基更能滿(mǎn)足病毒生產(chǎn)階段細胞的營(yíng)養需求。

流感疫苗

流感疫苗長(cháng)期以來(lái)一直使用雞胚生產(chǎn)，自Vero細胞被引人流感疫苗生產(chǎn)后，經(jīng)實(shí)驗證實(shí)幾乎所有在雞胚中測試的病毒株都能在Vero細胞中生長(cháng)并達到高滴度。采用Vero細胞無(wú)血清培養技術(shù)生產(chǎn)流感疫苗不僅能提高疫苗的產(chǎn)量和質(zhì)量，其重要性更在于能縮短疫苗生產(chǎn)周期、提高疫苗生產(chǎn)的計劃性，從而更有效地應對流感的暴發(fā)。

脊髓灰質(zhì)炎疫苗

   國外很早就有1 000 L生物反應器規模灌注培養Vero細胞生產(chǎn)脊髓灰質(zhì)炎疫苗的實(shí)例。目前，Vero細胞無(wú)血清培養生產(chǎn)脊髓灰質(zhì)炎疫苗仍處于研發(fā)階段。Cinatl等的研究結果表明，靜置培養下無(wú)血清培養基和含血清培養基中的Vero細胞生長(cháng)和病毒生產(chǎn)無(wú)明顯差別，甚至無(wú)血清培養基中病毒的比生產(chǎn)率更高一些。

腸道病毒71疫苗

2008年伊始在我國安徽、北京等地暴發(fā)的手足口病是一種由腸道病毒71(EV71)感染引發(fā)的嚴重的兒童神經(jīng)系統疾病。由于目前尚無(wú)針對該病毒的有效抗病毒劑，開(kāi)發(fā)有效的疫苗成為控制由EV71感染引發(fā)的手足口病的有效措施。

病毒性疫苗生產(chǎn)所使用的細胞培養基大多為M199、MEM或DMEM合成培養基，添加一定比例的滅能新生牛血清來(lái)進(jìn)行。生產(chǎn)的過(guò)程是按 GMP的要求進(jìn)行檢查評定的，細胞培養基更換批號或更換廠(chǎng)家，血清批次間的差異經(jīng)常出現影響細胞生長(cháng)的情況。

締一生物為您推薦一款可用于Vero細胞培養的無(wú)血清培養基，由HiMedia公司生產(chǎn)的SFRE 199-1和SFRE 199-2，是在動(dòng)物細胞培養基M199的基礎上研發(fā)出來(lái)的。

其主要區別是SFRE-199-1和SFRE-199-2將M199標準配方中的精氨酸增加到150mg/L，半胱氨酸增至4mg/L，胱氨酸增至40mg/L，谷氨酰胺增至300mg/L，谷氨酸增至75mg/L，甘氨酸增至100mg/l，組氨酸增至40mg/L，酪氨酸增至80mg/L，以獲得較大的細胞生長(cháng)而未表現出毒性。與加胎牛血清的常規培養基比較，細胞生長(cháng)速率、產(chǎn)量和蛋白容量均相同。均在移植后第6天單層細胞達到充分融合。

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