Vero細胞的來(lái)源及優(yōu)勢介紹

近年來(lái)隨著(zhù)生物技術(shù)的發(fā)展，動(dòng)物細胞培養技術(shù)已從簡(jiǎn)單的試驗研究拓展到了生物學(xué)研究和商業(yè)應用領(lǐng)域。生物制品如生物基因工程疫苗、病毒性疫苗、醫學(xué)治療性抗體的研究與生產(chǎn)都用到了細胞培養技術(shù)。應用較廣泛較安全的動(dòng)物細胞基質(zhì)是Vero細胞。Vero細胞是世界衛生組織(WHO)和《中國藥典》認可的疫苗生產(chǎn)細胞系。

Vero細胞(非洲綠猴腎細胞)是日本學(xué)者Yasumura和Kawakita兩人在1962年正式從非洲綠猴腎臟分離的，初次用于生產(chǎn)人用生物制品的異倍體貼附依賴(lài)性細胞，并建立了細胞系和不同代次的細胞庫。在此之前，對生物制品的研究和生產(chǎn)只允許用原代細胞或二倍體細胞。

二倍體細胞系傳代次數有限，當傳代達到一定代次后就會(huì )衰老凋亡，致使生產(chǎn)工藝無(wú)法投入到規?；a(chǎn)。長(cháng)久以來(lái)，人們對將傳代細胞作為生物制品生產(chǎn)基質(zhì)的考慮和應用很少，因檢測手段有限，對其致瘤性和外源性污染等特性研究不清楚，直到1987年，WHO才正式批準傳代細胞系作為生物制品生產(chǎn)的基質(zhì)。

Vero細胞被批準用于人用疫苗的生產(chǎn)后，開(kāi)始生產(chǎn)的人用疫苗是Barrett等[1]生產(chǎn)的脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗(IPV)，之后Vero細胞用于狂犬病毒疫苗和口服脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗(OPV)等多種人用疫苗生產(chǎn)。Vero細胞在病毒性疫苗生產(chǎn)的應用已有30年之久，尤其是狂犬病毒疫苗和脊髓灰質(zhì)炎疫苗。

Vero細胞系廣泛應用于人用疫苗的生產(chǎn)是基于其*的特性。Vero細胞因其固有的基因缺陷，不能表達抗病毒蛋白干擾素。Barrett等[1]試圖用新城疫病毒、仙臺病毒、風(fēng)疹病毒感染Vero細胞生產(chǎn)干擾素，結果表明Vero細胞不能表達分泌干擾素蛋白。然而，在相同條件下，改用BSC-1細胞和其他靈長(cháng)類(lèi)動(dòng)物細胞重復這一實(shí)驗時(shí)，這些細胞系可以表達分泌大量干擾素蛋白。有文獻報道，Vero細胞可能存在β和α基因的缺陷，不能表達干擾素蛋白[2]。Vero細胞的廣泛易感特性促進(jìn)了使用Vero細胞生產(chǎn)疫苗事業(yè)的發(fā)展。

除了以上優(yōu)勢，與生產(chǎn)生物制品生產(chǎn)用原代細胞系和二倍體細胞系相比，Vero細胞還具有以下優(yōu)勢：

一、來(lái)源方便，容易建立細胞庫和保存，可連續傳代，生長(cháng)速度快；

二、Vero細胞遺傳性狀穩定，惡性化概率小，無(wú)外源性污染，具有良好的生物安全特性；

三、Vero細胞對多種病毒敏感，生產(chǎn)的病毒滴度高；

四、Vero細胞對培養條件要求不高，在微載體表面能良好的貼附生長(cháng)，易在生物反應器放大培養。

培養基的質(zhì)量直接關(guān)系到疫苗的品質(zhì)。目前用于Vero細胞的培養基主要有M199、MEM、DMEM等合成培養基。近有報道，HiMedia公司生產(chǎn)的SFRE 199培養基（SFRE 199是在基礎培養基M199的基礎上改良的）也可用于Vero細胞的無(wú)血清培養[3]。如下圖所示，分別用添加水解乳蛋白的F-12和SFRE 199-1培養Vero細胞，結果顯示Vero細胞在無(wú)血清的SFRE199-1中生長(cháng)狀態(tài)良好。

參考文獻

［1］ Barrett PN，Mundt W，Kistner O，et al． Vero cell platform in vaccine production: moving towards cell culture-based virul vaccines［J］． Expert Ｒev Vaccines，2009，8(5) ，607-618．

［2］ 吳雪伶，袁寶珠． 干擾素系統的完整性與 Vero 細胞病毒敏感性的相關(guān)性［C］/ /2012 年中國藥學(xué)大會(huì )暨第十二屆中國藥師周論文集． 北京: 中國藥學(xué)會(huì )，2012．

［3］ Jack Litwin.The growth of Vero cells in suspension as cell-aggregates in serum-free media. State Bacteriology Laboratory, 105 21 Stockholm, Sweden.

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