Vero細胞的培養方式

Vero細胞是世界衛生組織和中國生物制品規程認可的病毒疫苗生產(chǎn)細胞系 。采用 V ero 細胞培養技術(shù)生產(chǎn)的病毒疫苗主要包括狂犬病疫苗、脊髓灰質(zhì)炎疫苗、流感疫苗、乙型腦炎疫苗、出血熱疫苗和手足口病疫苗等。Vero細胞有貼壁特性，很大程度上決定了病毒疫苗的生產(chǎn)是通過(guò)Vero細胞的微載體固定化培養而得以實(shí)現。

軍科院生物工程所曾比較了四種商品化微載體對Vero細胞生長(cháng)的影響。他們先取適量的微載體，然后用PBS浸泡過(guò)夜，再吸出PBS，用PBS清洗3次，再高壓消毒后，加入含1%新生牛血清的DMEM/F12，放置在37℃培養箱備用。

Vero細胞則按2X105細胞/ml接種培養瓶和轉瓶，再加入含1%新生牛血清的DMEM/F12，置37℃培養箱培養。需要時(shí)進(jìn)行傳代。之后將該細胞作為種子細胞。

然后將固定質(zhì)量的4種微載體分別移入250mlBellco攪拌式細胞培養瓶。Vero細胞接種后，補足培養基至100ml，設置攪拌速度為30r/min懸浮培養。根據培養基顏色在必要時(shí)更換新鮮培養基。

研究人員用顯微鏡觀(guān)察細胞形態(tài)，并取1ml細胞懸液進(jìn)行細胞計數以測定Vero細胞密度和活力（儀器采用細胞密度和活力自動(dòng)分析儀），采用多參數生物分析系統定量檢測細胞培養上清中的葡萄糖、乳酸和谷氨酰胺濃度，因而可測算葡萄糖比消耗速率，乳酸比生產(chǎn)速率等。

微載體固定化培養被廣泛應用于病毒疫苗和重組蛋白藥物生產(chǎn)。結果顯示，在四種商品化微載體中，Cytodex 1微載體（固體實(shí)心微球）效果較好，細胞密度高。同時(shí)細胞代謝速率在四種微載體中都很接近。研究者還指出，Vero細胞在接種后24h才基本完成貼壁階段。

在該次培養中，新生牛血清用量為1%，雖然用量較少，但仍*。上海締一生物生物公司進(jìn)口的澳洲產(chǎn)Ausbian精制新生牛血清(γ照射)系新西蘭血源（來(lái)自新西蘭政府獸醫管理局監管下的具有出口注冊證的正規屠宰場(chǎng)），GMP標準生產(chǎn)。

品名：Ausbian精制新生牛血清

貨號：VS500N

批號：1712A

規格：500ml/瓶

市場(chǎng)價(jià)：1600元

歡樂(lè )價(jià)：800元

*活動(dòng)：買(mǎi)10瓶送3瓶，100瓶送40瓶

血清經(jīng)過(guò)0.22微米過(guò)濾和15kGy的gamma射線(xiàn)照射，降低微生物風(fēng)險，經(jīng)檢測無(wú)BVD（牛病毒性腹瀉病毒）、PI-3（牛副流感病毒3型）和IBR（牛傳染性鼻氣管炎）。歡迎廣大新生牛血清用戶(hù)前來(lái)咨詢(xún)購買(mǎi)。

參考文獻

劉紅，等.   Vero細胞在不同微載體固定化培養中的生長(cháng)和代謝. 現代生物醫學(xué)進(jìn)展. 2012, 12 (36): 7001-7006