HiMedia培養基的質(zhì)控流程

HiMedia提供種類(lèi)繁多的培養基配方，包括標準培養基和客戶(hù)定制的培養基。培養基以脫水形式提供，可用于不同領(lǐng)域：臨床、食品、環(huán)境、化妝品、乳品、水、制藥行業(yè)等。也包括各種藥典的具有各種應用的培養基，如無(wú)菌檢查，微生物限度檢查等。

M1991I    CCA顯色培養基

我們的質(zhì)量保證

流程分為以下三類(lèi)：

1.原料檢查

2.半成品檢查

3.成品檢查

Ø原料

微生物培養基的設計，需要對每個(gè)成分進(jìn)行統計學(xué)意義上的評估，并測量每個(gè)成分之間的相互作用。清楚這兩點(diǎn)非常重要，HiMedia因此在生產(chǎn)前和生產(chǎn)過(guò)程中，采取了不同的質(zhì)控檢測措施。理想的終產(chǎn)品需要具有可預測的可重復的結果。

只有高品質(zhì)的原料才用于生產(chǎn)HiMedia的產(chǎn)品。原料只從合格的供應商那里購買(mǎi)。每個(gè)原料會(huì )根據各國藥典去分析它的級別、品質(zhì)和純度。對于沒(méi)有具體規定的原料和化學(xué)品，我們有質(zhì)量保證部門(mén)制訂的自己的室內標準。

加入脫水培養基中的各種原料有：

1.蛋白胨、HiVegTM蛋白胨、HiCynthTM蛋白胨、肉提取粉B（相當于牛肉粉）作為氮源

2.碳水化合物作為碳源

3.礦物質(zhì)（金屬和無(wú)機鹽）

4.選擇因子

5.維生素

6.染料和pH指示劑

7.凝固劑

1.蛋白胨（肉、酪蛋白、大豆、明膠、酵母）、HiVegTM蛋白胨和HiCynthTM蛋白胨

蛋白質(zhì)水解的降解產(chǎn)物俗稱(chēng)蛋白胨，是多肽，寡肽，氨基酸，有機氮堿，鹽和微量元素的的混合物。生產(chǎn)出的各種蛋白胨反映了微生物對氨基酸和多肽的不同需求。蛋白質(zhì)（酪蛋白，肉或大豆）來(lái)源和水解類(lèi)型不同（如酶解或酸水解，酶解包括胰蛋白酶、胃蛋白酶或木瓜蛋白酶），其蛋白胨也存在著(zhù)變化。HiCynthTM蛋白胨是化學(xué)成分確定的蛋白胨，其提供的氮源營(yíng)養與其他動(dòng)物或植物蛋白胨等同。

圖. 采用不同蛋白胨培養的E.coli生長(cháng)曲線(xiàn)

除了HiMedia自己的標準，蛋白胨還依據美國藥典關(guān)于“動(dòng)物組織的酶解”以及相似的“酪蛋白的胰蛋白酶水解”標準進(jìn)行分析。

2. 碳水化合物

一些微生物能利用的碳水化合物（糖）種類(lèi)非常廣泛，而其他微生物對糖的選擇更為挑剔，后者更通過(guò)糖發(fā)酵能力進(jìn)行鑒定。大量培養基配方包含特定的糖和指示劑，以用于檢測特定的酶反應和用于診斷。

培養基中的糖會(huì )被檢測，以保證其化學(xué)身份和純度。

糖對于微生物的支持生長(cháng)也會(huì )通過(guò)固體培養基或液體培養基進(jìn)行檢測，并與標準品比對。在固體培養基中，菌落的特征也會(huì )被檢查。

MV378   動(dòng)力學(xué)吲哚鳥(niǎo)氨酸HiVeg培養基

1.對照

2.大腸埃希菌（ATCC 25922）

3.肺炎克雷伯菌（ATCC 13883）

4.奇異變形桿菌（ATCC 25933）

M689   Moeller脫羧酶肉湯（含鹽酸精氨酸）

1.對照

2.弗氏腸桿菌（ATCC 8090）

3.產(chǎn)氣腸桿菌（ATCC 13048）

4.大腸埃希菌(ATCC 25922）

5 肺炎克雷伯菌（ATCC 13883）

6.普通變形桿菌（ATCC 13315）

7.銅綠假單胞菌（ATCC 9027）

8.傷寒沙門(mén)氏菌(ATCC 6539）

9.福氏志賀氏菌（ATCC 12022）

3. 礦物質(zhì)和化學(xué)品

所有生命體的生長(cháng)和代謝都需要一些無(wú)機鹽。大多數細菌可通過(guò)培養基中添加

鈉、鉀、鎂、錳、二價(jià)鐵或三價(jià)鐵離子（以氯鹽、磷酸鹽、硫酸鹽形式）得到滿(mǎn)足。

4.選擇因子（膽鹽或牛膽汁）

膽鹽具有選擇性，用于鑒別那些能在腸道環(huán)境中生存的細菌，而不能生存的細菌。根據細菌對膽鹽的耐受性，在培養基中可升高膽鹽或膽鹽衍生物的濃度。

膽鹽的化學(xué)分析流程和標準是依據各國藥典關(guān)于脫氧膽酸鈉、膽酸鈉和?；悄懰徕c。當膽鹽加入培養基時(shí)，它不應影響指示劑的顏色或隨后的顏色變化。它不應在培養基儲存后在表面形成泡沫或形成沉積。膽汁進(jìn)一步的功能測試是通過(guò)標準膽鹽作為對照。而且，細菌的回收試驗是采用E.coli作為測試菌株之一，而膽鹽的已知性能作為對照。采用不同膽鹽制備的固體培養基是通過(guò)Miles-Misra方法進(jìn)行測試。每種培養基關(guān)于不同腸桿菌科成員的生長(cháng)回收率進(jìn)行了記錄。

5. 染料和pH值指示劑

添加到培養基中的染料也可用作選擇劑或pH指示劑或者Eh指示劑。當用作選擇劑時(shí)，染料和配方中的其他成分之間可能發(fā)生相互作用。因此，同樣的煌綠樣品在不同的蛋白胨溶液中，對大腸桿菌可能會(huì )顯示出不同的抑制效果。膽鹽和煌綠相互作用，會(huì )減少染料的毒性，因此通過(guò)膽汁鹽培養基的染料加入，可以確定這些染料的毒性水平。苯胺染料在*氧化時(shí)毒性更大，因此它在蛋白胨或胰蛋白胨里滅菌時(shí)，發(fā)生染料的還原，從而導致毒性變化是可能的。如果培養基中使用的瓊脂礦物質(zhì)含量高，與培養基成分不相容的情況可能就會(huì )發(fā)生。

因此，我們按照H.J. Conn撰寫(xiě)的標準（注：2002年出版的Conn's Biological Stains,第10版）去分析我們培養基中使用的染料。除了確定染料的化學(xué)純度外，還開(kāi)展微生物適應性檢查。這些通過(guò)各種“測試用微生物”去檢測，并與標準染料比較。

6. 凝固劑

瓊脂在培養基中的初作用是形成凝膠。瓊脂的透明度非常重要。理想狀況是瓊脂溶液是透明的，沒(méi)有任何霧狀或沉淀。霧狀是因為礦物質(zhì)的不相容或過(guò)濾后還有殘渣。瓊脂的另一個(gè)特點(diǎn)是它允許化合物擴散，同時(shí)將水固定在剛性凝膠中。這個(gè)屬性被用于某些維生素和抗生素的微生物法測定，如藥敏試驗的擴散法，而維生素則產(chǎn)生出成比例的生長(cháng)帶。

在瓊脂用于細菌學(xué)方面時(shí)，它的化學(xué)不純成分也進(jìn)行了分析。

除了以上檢測，還檢測了瓊脂的毒性，以觀(guān)察是否存在毒性或抑制物質(zhì)。方法是讓苛養型微生物在培養基上生長(cháng)，其生長(cháng)狀況、菌落大小、菌落形狀、色素等，和已知的標準瓊脂進(jìn)行比較。

7.維生素

維生素和化學(xué)品是根據美國藥典和美國Food Chemical Codex進(jìn)行分析的。主要分析化學(xué)純度和其他參數。它們的效力則通過(guò)AOAC（美國分析化學(xué)家協(xié)會(huì )）的微生物方法進(jìn)行驗證。

8.顯色底物

HiCrome的顯色培養基中都含有顯色底物，并且通常是2種顯色原的混合物。顯色原作為底物，被生長(cháng)菌的特異酶裂解，菌落產(chǎn)生不同顏色而可鑒別。例如，X-葡萄糖酸苷被E.coli的葡萄糖醛酸酶裂解，產(chǎn)生葡萄糖醛酸，并將藍綠色帶給菌落。

M1575

HiCrome EC 0157:H7選擇性瓊脂基礎

E. coli 0157:H7菌落

Ø半成品

一個(gè)樣本批次通過(guò)已測試并通過(guò)的組分制備，并和以前已通過(guò)批準的*培養基批次進(jìn)行并排分析。在確保所有參數如顏色、透明度、pH值、可溶性、成膠性和培養特征，以及保證培養基組分的相容性后，該批次可用于大規模的生產(chǎn)。

在生產(chǎn)中，每個(gè)環(huán)節會(huì )小心遵循GMP標準。中間階段，會(huì )取樣并送至質(zhì)控實(shí)驗室，根據HiMedia自己的規定，進(jìn)行微生物評價(jià)和純度分析。

半成品批次在可控條件下（如溫度、濕度等）連續記錄。生產(chǎn)過(guò)程采用不銹鋼設備或玻璃設備，避免產(chǎn)品被有毒金屬污染。

Ø成品

每個(gè)HiMedia產(chǎn)品都有確定的產(chǎn)品參數，它們包括合格產(chǎn)品的標準和成品批次的發(fā)布。成品需符合以下標準：

而且，我們建立了*的室內標準，將批間差異（因生物材料的相互影響）降低到0。

Ø可追溯性

作為一個(gè)ISO/CE認證的公司，可追溯性是一個(gè)重要的質(zhì)量系統建立的標準。每個(gè)原料和每次生產(chǎn)過(guò)程都有細心的記錄。合格的成品樣品和生產(chǎn)過(guò)程中的各種記錄都有存檔，便于未來(lái)參考。

Ø驗證

如果用戶(hù)將該培養基用于說(shuō)明書(shū)、技術(shù)文件和COA上所列的用途之外，而又不及時(shí)分享這樣的意圖，這將消除我們在此事上的責任。建議客戶(hù)在自己的實(shí)驗室進(jìn)行驗證和測試。HiMedia是您值得信賴(lài)的合作伙伴，在與培養基相關(guān)的驗證過(guò)程中給予幫助。

M1297AR 念珠菌鑒別瓊脂

Ø穩定性研究

有代表性的批次可開(kāi)展穩定性研究，以確定新產(chǎn)品的保質(zhì)期，以及驗證庫存產(chǎn)品的效力。6個(gè)月后，代表的批次會(huì )再次測試，以和參考產(chǎn)品比較，從而驗證產(chǎn)品的穩定性。

M1651   芽孢桿菌顯色培養基

Ø分析證書(shū)

發(fā)布的每一批次都有詳細的分析證書(shū)，上面有產(chǎn)品的合格標準和測試結果。分析證書(shū)的紙質(zhì)拷貝可索引獲得，或直接從我們網(wǎng)站下載