顯色培養基在臨床微生物學(xué)上的應用（下）

大腸桿菌O157的檢測

大腸桿菌O157：H7與人類(lèi)的出血性腸炎和溶血性尿毒綜合征有關(guān)。盡管大規模爆發(fā)非常罕見(jiàn)，但癥狀卻很?chē)乐?，甚至導致死亡。在英國，已推薦對所有腹瀉患者的糞便進(jìn)行O157的檢查。針對大腸桿菌O157的顯色培養基市面上已有好幾款，大部分基于相似的原理：依靠對山梨醇和/或鼠李糖的不發(fā)酵，以及缺少β-葡萄糖醛酸酶活性。這些生化標志物，加上選擇因子，能幫助將大部分大腸桿菌O157菌株同非致病性大腸桿菌和其他共生菌區分開(kāi)來(lái)。也有的顯色培養基使用第二種顯色底物（如或β半乳糖苷酶），以突出大腸桿菌O157的存在。

有人曾對大腸桿菌O157顯色培養基的性能進(jìn)行評估，發(fā)現它對識別大腸桿菌O157：H7的靈敏度和特異性很高，但對于許多其他產(chǎn)Vero毒素的大腸桿菌血清型，如大腸桿菌O26（該菌株產(chǎn)β-葡萄糖醛酸酶），則不夠可靠。要檢測所有產(chǎn)Vero毒素的大腸桿菌菌種，還需要采用另外的策略來(lái)證實(shí)糞便中毒素的存在，如免疫學(xué)技術(shù)或核酸擴增技術(shù)檢測毒素的基因。

圖. HiMedia大腸桿菌O157顯色培養基（貨號MV157）

酵母的檢測和鑒別

已有好幾種顯色培養基用于檢測酵母，這些顯色培養基和傳統培養基（如沙氏瓊脂）相比，被證明在鑒別酵母不同物種上具有更優(yōu)異的性能。這些顯色培養基的共同原理是納入了β氨基己糖苷酶，使得對于常見(jiàn)的和具有臨床重要意義的白色念珠菌，能夠被鑒別和鑒定出來(lái)。

有人報道過(guò)，和傳統的芽管形成試驗相比，以β氨基己糖苷酶活性檢測為基礎的顯色培養基，對白色念珠菌的檢測是靈敏的，更為特異的，較少主觀(guān)性，且更為快速?；谶@個(gè)原因，加上成本分析，作者得出結論，分離酵母的顯色培養基比傳統培養基在經(jīng)濟上更有優(yōu)勢。

顯色培養基通?？蓪⒑脦追N不同的念珠菌物種區分開(kāi)來(lái)，但也存在一定局限。例如，臨床樣本中遇到的光滑念珠菌，缺乏特異性的顯色標志物。另一個(gè)局限是難以區分都柏林念珠菌和白色念珠菌。它們都具有β氨基己糖苷酶活性。有人將Pal's的培養基與顯色培養基合并，它可以刺激都柏林念珠菌產(chǎn)生厚膜孢子，形成粗糙菌落，從而與白色念珠菌相區分。

也有人進(jìn)行補充的生化試驗或血清學(xué)試驗，以輔助顯色培養基。例如，乳膠凝集試驗可用于特異性的鑒定克柔念珠菌和都柏林念珠菌的菌落。海藻糖吸收試驗也可快速鑒定光滑念珠菌。

圖. HiMedia念珠菌顯色培養基（左：貨號M1297A；右：貨號M1297AR）

無(wú)乳鏈球菌的檢測

無(wú)乳鏈球菌（B族鏈球菌）是一種可導致新生兒死亡的感染性疾病病因。一些對于孕婦的陰道拭子進(jìn)行這種病原體的常規篩查。B族鏈球菌顯色培養基可用于檢測無(wú)乳鏈球菌。在一項對134個(gè)陰道拭子B族鏈球菌進(jìn)行檢測的研究中，顯色培養基表現出比血平板更高的特異性和靈敏度。在一項有737個(gè)樣本的大型研究中，有人報道了B族鏈球菌顯色培養基比Granada培養基或選擇性血平板具有更高的靈敏度。在孵育48h后，它使菌株的回收率增加，作者還強調在分離之前，應使用選擇性增菌肉湯。

圖.HiMedia的B族鏈球菌顯色培養基（貨號：M1966）。菌落為無(wú)乳鏈球菌菌落。

結論和展望

在許多研究中，顯色培養基被證實(shí)其對傳統培養基所具有的優(yōu)勢，即更出色的檢測率，及對混合菌群的鑒別能力。包含顯色底物的顯色培養基價(jià)格毫無(wú)疑問(wèn)地要比傳統培養基高，但它可被與可疑菌株驗證和平板制備相關(guān)的試劑消耗和勞動(dòng)時(shí)間的減少所抵消。

由于這些因素，在診斷實(shí)驗室中顯色培養基的應用越來(lái)越普遍。很可能在未來(lái)幾年內，針對更多病原體的顯色培養基會(huì )被開(kāi)發(fā)出來(lái)。針對食品中弧菌和彎曲菌的顯色培養基，也在被評估用于臨床診斷。對MRSA等耐藥菌篩查的顯色培養基則進(jìn)一步推動(dòng)了針對其他耐藥菌的顯色培養基的應用和開(kāi)發(fā)。幾乎所有商用顯色培養基都依賴(lài)于檢測糖苷酶、磷酸酶或酯酶活性。大多數細菌病原體產(chǎn)生豐富的肽酶，但這些肽酶到目前為止仍未開(kāi)發(fā)。對這些酶活性的識別和適當顯色底物的設計，將使得針對其他致病菌（例如軍團菌）的更多顯色培養基的開(kāi)發(fā)成為可能。

參考文獻

J.D. Perry and A.M. Freydie`re. The application of chromogenic media in clinical microbiology.Journal of Applied Microbiology. 2007,103: 2046–205

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