危險的耐藥致命菌—粘菌素耐藥菌

粘菌素（Colistin）又稱(chēng)多粘菌素，屬于抗革蘭氏陰性菌藥物的一種，臨床上主要用于治療革蘭陰性菌感染，特別是綠膿桿菌和大腸桿菌引起的各種感染，如呼吸系統感染、腹膜炎、膽管感染、尿路感染、燒傷感染、眼角膜感染及敗血癥等。

粘菌素存在副作用，包括腎毒性和耳毒性（1,2）。國內外科研人員對粘菌素進(jìn)行了更廣泛更深入的研究。例如，中國鑒定了由mcr-1 pEtN基因引起的質(zhì)粒介導的粘菌素（COL）耐受（3）。而近的臨床數據還表明，如果采取某些預防措施，粘菌素的使用是可以被接受的（4）。

《抗菌藥物臨床應用指導原則(2015年版)》中指出，近年來(lái)，多重耐藥革蘭氏陰性菌日益增加，碳青霉烯類(lèi)耐藥腸桿菌科細菌、多重耐藥銅綠假單胞菌等對多粘菌素類(lèi)藥物耐藥率低，因此多粘菌素藥物重新成為被選用的藥物之一。

粘菌素對銅綠假單胞菌的抗菌作用為顯著(zhù)，對大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、痢疾桿菌、流感桿菌、產(chǎn)氣桿菌及肺炎桿菌等也有良好的作用。但隨著(zhù)抗生素的濫用，耐粘菌素的細菌被不斷發(fā)現并報道，其在世界范圍內蔓延并引起人類(lèi)感染甚至死亡。

在臨床或試驗中，分離檢測粘菌素耐藥菌需要使用粘菌素耐藥菌顯色培養基。HiMedia公司生產(chǎn)的粘菌素耐藥菌顯色培養基（貨號：M2094，品名：HiCrome™ Colistin Resistant Agar Base）特異性高、靈敏度高，用于快速分離、鑒定革蘭氏陰性粘菌素耐藥菌。而且，經(jīng)分離后的菌種還可用作后續進(jìn)一步試驗。

M2094中的酸水解酪蛋白提供氮源和碳源化合物、長(cháng)鏈氨基酸、硫和其他必需營(yíng)養素。顯色混合物有助于顏色鑒別。

加入添加劑FD355,35-37℃培育18-24小時(shí)后，顯色底物被粘菌素抗性大腸桿菌產(chǎn)生的β-D-半乳糖苷酶特異性裂解，產(chǎn)生粉紅色至紫色的菌落。粘菌素抗性肺炎克雷伯菌裂解另一種顯色底物，產(chǎn)生金屬藍色的菌落。假單胞菌產(chǎn)生的無(wú)色菌落可能含有輕微的綠色的色素。來(lái)自蛋白胨的苯丙氨酸和色氨酸有助于檢測色氨酸脫氨酶活性，指示變形桿菌、摩根菌和普羅維登西的存在，它們菌落呈現褐色。

其中耐粘菌素大腸桿菌、耐粘菌素肺炎克雷伯菌、耐粘菌素銅綠假單胞菌接種量為50-100CFU，在培養基上旺盛生長(cháng)且回收率≥50％.粘菌素敏感的革蘭氏陰性菌和金黃色葡萄球菌接種量為10³CFU，在培養基上生長(cháng)受抑制且回收率為0％.

圖1：HiCrome粘菌素耐藥菌顯色培養基

M2094被用作篩選培養基，符合歐盟體外診斷醫療器械注冊資格（歐盟IVDD），分離后的菌株應遵循《美國臨床和實(shí)驗室標準協(xié)會(huì )》（CLSI）指南，進(jìn)一步檢測分離菌株對粘菌素的敏感性。

參考文獻

1. Cheng YH, Lin TL, Pan YJ, Wang YP, Lin YT, Wang JT.2015. Colistin resistance mechanisms in Klebsiella pneumoniae strains from Taiwan. Antimicrob Agents Chemother 59:2909–2913. doi:10.1128/AAC.04763-14.

2. Lim LM, Ly N, Anderson D, Yang JC, Macander L, Jarkowski A, Forrest A, Bulitta JB, Tsuji BT.2010. Resurgence of colistin: a review of resistance, toxicity, pharmacodynamics, and dosing. Pharmacotherapy 30:1279–1291. doi:10.1592/phco.30.12.1279.

3. Liu YY, Wang Y, Walsh TR, Yi LX, Zhang Retal. Emergence of plasmid-mediated colistin resistance mechanism MCR-1 in animals and human beings in China: a microbiological and molecular biological study. Lancet Infect Dis 2016;16

4. Falagas ME, Rafilidis PI.2009. Nephrotoxicity of colistin: new insight into an old antibiotic. Clin.Infect. Dis. 48:1729-1721.

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