胎牛血清在培養細胞中,重要的是利用它的活性的因子,因此,融化過(guò)程中大限度地保留因子的活性,就變得非常重要。本文締一生物為您詳細解讀胎牛血清的三步融化法。
回憶一下,細胞復蘇時(shí),要保持細胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢?快融!血清同樣如此!三步法需要兩個(gè)半小時(shí),4℃過(guò)夜需要大約10個(gè)小時(shí)(冰箱一般設2-8℃,所以各實(shí)驗室融化時(shí)間會(huì )稍有出入)。哪個(gè)速度對保留活性更好?不言而喻!
下面,我們詳細解讀『血清的三步融化法』的步驟:
圖:剛從-28℃拿出的血清,是這個(gè)樣子的
融化血清一步
溫度:室溫
時(shí)間:100ml - 35分鐘
500ml - 90分鐘
1000ml - 100分鐘
或
溫度:15-20℃水?。ㄐ陆拥淖詠?lái)水24℃上下)
時(shí)間:100ml - 5分鐘
500ml - 18分鐘
1000ml - 20分鐘
圖:這是近Ausbian血清的大區經(jīng)理,在天津血研所實(shí)驗室拍到的——實(shí)驗人員三步法化血清的圖片,為了節約時(shí)間,實(shí)驗人員采取的是一步20℃水浴18min的方法。(用現接的自來(lái)水放入冰凍的血清,即可達到20℃水浴的效果。一般實(shí)驗室沒(méi)有能制冷到20℃的水浴鍋)
融化血清第二步
溫度:20℃水?。ㄐ陆拥淖詠?lái)水24℃上下)
時(shí)間:100ml - 15分鐘
500ml - 25分鐘
1000ml - 30分鐘
圖:第二步,仍舊是新接的自來(lái)水浴,25min
融化血清第三步
溫度:37℃水浴
時(shí)間:100ml - 20分鐘
500ml - 35分鐘
1000ml - 45分鐘
第三步,將血清置于37℃水浴鍋中進(jìn)行融化,大約30nmin左右,血清就*融化,可以分裝了。
圖:大家看,使用三步法融化的血清十分清亮,養細胞的效果也是棒棒噠。
綜上所述,您是不是已經(jīng)對胎牛血清的三步融化法,有所了解。如果還有其他疑問(wèn),請咨詢(xún)締一生物/締一生物資深專(zhuān)家。