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透析胎牛血清的應用

更新時(shí)間:2020-04-23  |  點(diǎn)擊率:858

透析胎牛血清主要用于可能需要關(guān)注小分子濃度的特殊研究。這主要包括四個(gè)領(lǐng)域:蛋白質(zhì)組學(xué)、同位素標記、細胞通訊以及報告基因細胞系的篩選,其中有些領(lǐng)域是相互交叉的。以下稍作舉例。

 

a. 細胞培養條件下穩定同位素標記技術(shù)(簡(jiǎn)稱(chēng)SILAC)。

這是一項以質(zhì)譜為基礎的定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),全稱(chēng)為Stable isotope labeling with amino acids in cell culture (SILAC)。它將13C或15N標記的氨基酸摻入到培養基中培養細胞,來(lái)標記細胞內新合成的蛋白質(zhì),一般培養5-6代,細胞中的蛋白質(zhì)將都被同位素標記。然后質(zhì)譜分析,即可比較經(jīng)過(guò)不同處理的細胞,其內部蛋白質(zhì)豐度的變化。它還可用于正常細胞與病理狀態(tài)細胞二者的比較。為避免胎牛血清中天然氨基酸的干擾,這時(shí)就需要用到透析胎牛血清,以保證摻入細胞蛋白中的氨基酸均為標記氨基酸(常采用賴(lài)氨酸或精氨酸)。

 

b. 工程細胞株的篩選。

以常見(jiàn)的工程細胞株CHO-DFGRˉ為例,該細胞自身缺乏二氫葉酸還原酶(DHFR),必須在添加了次黃嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸的培養液中才能得以存活。如將含有目的基因與DHFR基因的質(zhì)粒轉染細胞,則可以得到在不含上述添加劑的培養基上也能生長(cháng)的細胞克隆。通過(guò)甲氨蝶呤(MTX)進(jìn)一步篩選,可進(jìn)一步得到能表達大量目的蛋白的細胞克隆。這時(shí)的胎牛血清由于不含有次黃嘌呤和胸腺嘧啶等,也常作為選擇培養基的一部分,參與陽(yáng)性轉染細胞克隆的篩選。

 

c. 研究某些因子如核苷酸或微量元素如硒、鋅對某種類(lèi)型細胞增殖、分化的影響。

這時(shí)也需要用透析胎牛血清,以避免培養體系中天然存在的這些物質(zhì)的干擾。

 

Ausbian透析胎牛血清特點(diǎn):

1.極低內毒素,支持各類(lèi)難養細胞;

2.同批號跟蹤發(fā)貨,確保實(shí)驗數據連續穩定;

3.海外廠(chǎng)家直供,市場(chǎng)價(jià)格透明;

4.十年誠懇信譽(yù),溫暖售后保證!

 

綜上所述,您是不是已經(jīng)對透析胎牛血清的應用,有所了解。如果還有其他疑問(wèn),請咨詢(xún)締一生物/締一生物資深專(zhuān)家

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