大腸桿菌顯色培養基在實(shí)驗過(guò)程中要怎么操作及注意些什么

　　大腸桿菌顯色培養基的原理

　　結合了顯色原和熒光基團，檢測β-葡萄糖醛酸酶的存在

　　大腸桿菌-藍至綠色，陽(yáng)性β-葡萄糖醛酸酶和陽(yáng)性熒光

　　其他大腸菌群-無(wú)色，陰性β-葡萄糖醛酸酶和陰性熒光

　　膽鹽混合物增加選擇性-革蘭氏陽(yáng)性菌被抑制

　　操作步驟：

　　1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液

　　2、取樣品液1ml加入冷卻至45-50℃顯色培養基中混勻或涂布于平板上

　　3、36±1℃培養18～24h，選用有30～200個(gè)菌落的平板，計數平板上出現的典型大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍綠色，其它細菌為無(wú)色或黃色菌落。

　　總大腸桿菌=藍綠色菌落

　　4、對可疑大腸桿菌菌落可劃線(xiàn)接種到營(yíng)養瓊脂平板上，36±1℃培養12-16小時(shí)，挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗

　　大腸桿菌顯色培養基操作注意事項

　　1、切片脫蠟應盡量干凈。

　　2、組織固定起著(zhù)非常重要的作用，使用不同的固定液可延或縮短染色時(shí)間。

　　3、經(jīng)典三色染色中，常要求使用試劑（A）染核，也可用蘇木精染核，但蘇木精染核后切片顏色不夠鮮艷，因為染色目的主要在于區分膠原纖維和肌纖維，一般也可以省略該染色步驟。

　　4、試劑（B）的分化時(shí)間應該依據切片厚薄、組織的類(lèi)別和新舊而定，。

　　5、試劑（E）為0.2%乙酸水溶液，可使色彩更清晰鮮艷，如果使用量大可自行配制。

　　6、用試劑（F）分化要在鏡下控制，分化到膠原纖維呈淡紅色；纖維呈紅色即可。分化時(shí)間根據染色深淺而定，一般1～2min。

　　7、返藍液常使用氨水水溶液，亦可自行配制Scoot促藍液或0.1～1%碳酸鋰水溶液，該產(chǎn)品森貝伽有售。

　　8、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

　　9、使用場(chǎng)所應通風(fēng)，并遠離火源。

　　以上便是今天關(guān)于大腸桿菌顯色培養基在實(shí)驗過(guò)程中要怎么操作及注意些什么的全部分享了，希望對大家今后使用本設備能有幫助。