淺談透析胎牛血清的作用

胎牛血清參與細胞培養，是細胞生長(cháng)天然的培養基，它為細胞提供激素、生長(cháng)因子、結合蛋白、脂質(zhì)、礦物質(zhì)、黏附和鋪展因子等來(lái)促進(jìn)體外細胞培養。但是在一些特殊的研究中也會(huì )使用到透析胎牛血清，我們來(lái)了解下透析胎牛血清的作用。

透析胎牛血清主要用于可能需要關(guān)注小分子濃度的特殊研究。這主要包括四個(gè)領(lǐng)域：蛋白質(zhì)組學(xué)、同位素標記、細胞通訊以及報告基因細胞系的篩選，其中有些領(lǐng)域是相互交叉的。以下稍作舉例。

細胞培養條件下穩定同位素標記技術(shù)（簡(jiǎn)稱(chēng)SILAC）。

這是一項以質(zhì)譜為基礎的定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，全稱(chēng)為Stable isotope labeling with amino acids in cell culture (SILAC)。它將13C或15N標記的氨基酸摻入到培養基中培養細胞，來(lái)標記細胞內新合成的蛋白質(zhì)，一般培養5-6代，細胞中的蛋白質(zhì)將都被同位素標記。然后質(zhì)譜分析，即可比較經(jīng)過(guò)不同處理的細胞，其內部蛋白質(zhì)豐度的變化。它還可用于正常細胞與病理狀態(tài)細胞二者的比較。為避免胎牛血清中天然氨基酸的干擾，這時(shí)就需要用到透析胎牛血清，以保證摻入細胞蛋白中的氨基酸均為標記氨基酸（常采用賴(lài)氨酸或精氨酸）。

工程細胞株的篩選。

以常見(jiàn)的工程細胞株CHO-DFGRˉ為例，該細胞自身缺乏二氫葉酸還原酶（DHFR），必須在添加了次黃嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸的培養液中才能得以存活。如將含有目的基因與DHFR基因的質(zhì)粒轉染細胞，則可以得到在不含上述添加劑的培養基上也能生長(cháng)的細胞克隆。通過(guò)甲氨蝶呤（MTX）進(jìn)一步篩選，可進(jìn)一步得到能表達大量目的蛋白的細胞克隆。這時(shí)的胎牛血清由于不含有次黃嘌呤和胸腺嘧啶等，也常作為選擇培養基的一部分，參與陽(yáng)性轉染細胞克隆的篩選。

研究某些因子如核苷酸或微量元素如硒、鋅對某種類(lèi)型細胞增殖、分化的影響。

這時(shí)也需要用透析胎牛血清，以避免培養體系中天然存在的這些物質(zhì)的干擾。