當我們在養細胞的時(shí)候,有可能會(huì )出現如下的狀況:
細胞生長(cháng)緩慢
細胞變形
碎片增加
懸浮細胞容易成團
培養基提前變色
鏡下發(fā)現有小黑點(diǎn)
如果排除了其他試劑選擇不當、細胞株老化、細菌污染……原因,而仍有上述一種或幾種情況,則高度提示:細胞可能出現了支原體污染。據報道,細胞培養中發(fā)生支原體污染的機率較高,會(huì )達到70%左右,常規抗生素的使用對支原體幾乎無(wú)效。
那么,支原體污染,對細胞培養有什么危害呢?
支原體穿透真核細胞表面 大量支原體聚集在真核細胞表面(掃描電鏡照片)
細胞被支原體污染,解決方案
方法一:確認細胞已被支原體污染,終止試驗,丟棄所有被污染的細胞和耗材。
重新復蘇細胞,注意選用未被污染的細胞株、血清和培養基,并規范操作。
方法二:對于珍貴的,樣品不可再得的細胞,或價(jià)格昂貴的種子細胞,不但無(wú)法丟棄,而且作為種子細胞,還需要**支原體污染。
此時(shí),需選用特異性的支原體殺除劑,清除污染,保護細胞。
目前世界上有效的方法是是德國的一款生物試劑,由Minerva公司生產(chǎn),品名Mynox®。