使用胎牛血清過(guò)程中常見(jiàn)問(wèn)題解答

培養珍貴的干細胞和較難養的細胞大部分實(shí)驗室均采用胎牛血清作為實(shí)驗耗材，它為細胞生長(cháng)提供了必要的營(yíng)養成分。但使用胎牛血清的過(guò)程也會(huì )常常出現問(wèn)題，我們來(lái)細數下。

細胞培養中出現黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?

一旦您在細胞培養的過(guò)程中發(fā)現有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀(guān)察培養基是否混濁，然后，在鏡下觀(guān)察培養細胞生長(cháng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細胞被污染，微生物則會(huì )大量繁殖，培養基就會(huì )迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。

如果在鏡下觀(guān)察細胞，生長(cháng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現前相比，沒(méi)有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現可能與以下幾種情況有關(guān)：

(1)細胞生長(cháng)過(guò)老，破碎的細胞殘骸;

(2)血清質(zhì)量不好，反復凍融的結果;

(3)配制培養基的pH值偏高，不宜細胞生長(cháng);

(4)配制培養基的水質(zhì)、容器不合格?？蓱秒x心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn);

(5)培養原代細胞中出現小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。