培養珍貴的干細胞和較難養的細胞大部分實(shí)驗室均采用胎牛血清作為實(shí)驗耗材,它為細胞生長(cháng)提供了必要的營(yíng)養成分。但使用胎牛血清的過(guò)程也會(huì )常常出現問(wèn)題,我們來(lái)細數下。
細胞培養中出現黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?
一旦您在細胞培養的過(guò)程中發(fā)現有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀(guān)察培養基是否混濁,然后,在鏡下觀(guān)察培養細胞生長(cháng)的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細胞被污染,微生物則會(huì )大量繁殖,培養基就會(huì )迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀(guān)察細胞,生長(cháng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現前相比,沒(méi)有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現可能與以下幾種情況有關(guān):
(1)細胞生長(cháng)過(guò)老,破碎的細胞殘骸;
(2)血清質(zhì)量不好,反復凍融的結果;
(3)配制培養基的pH值偏高,不宜細胞生長(cháng);
(4)配制培養基的水質(zhì)、容器不合格??蓱秒x心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn);
(5)培養原代細胞中出現小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。