細胞培養中,很容易發(fā)生支原體污染,而常見(jiàn)的青鏈霉素等大多數的抗生素對支原體又無(wú)效。因此選對一款有效且無(wú)需長(cháng)期使用的支原體祛除劑,對于挽救污染細胞可以起到?jīng)Q定性作用。
以往發(fā)現培養的細胞中存在支原體污染時(shí),應立即終止實(shí)驗,全部丟掉被污染的細胞,以避免支原體污染的擴散。而對于費力擴增的細胞(如已轉染,或經(jīng)過(guò)體外刺激),如果細胞中發(fā)現有支原體污染,但此細胞又不愿丟棄,希望繼續培養,又怎么辦呢?
這里向您推薦祛除細胞支原體污染的一種方法,其中要用到德國MB公司生產(chǎn)的專(zhuān)li復合抗生素Zell Shield®。
Zell Shield®特點(diǎn)
1) 高效廣譜
Zell Shield®通過(guò)同時(shí)阻止支原體、霉菌、酵母、細菌增殖過(guò)程中DNA及蛋白的合成,有效抑制上述微生物的增殖。
2) 安全
無(wú)細胞毒性,專(zhuān)li復合支原體敏感抗生素,對大多數細胞株無(wú)毒。
3) 活性穩定
在細胞培養期間,Zell Shield®始終保持穩定的活性。
4) 使用方便
Zell Shield®為無(wú)菌溶液,可直接加入培養基使用。
二、懸浮沖洗法 + Zell Shield®祛除支原體污染
據研究表明,約98%的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。支原體直徑約180~350nm,比細胞小很多,經(jīng)低速離心可與細胞分離。通過(guò)反復懸浮沖洗細胞、離心,加上使用Zell Shield®,即可在細胞培養四代以?xún)扔行У仂畛гw。
具體流程如下圖:
要點(diǎn)歸納:
1. 每次傳代時(shí),重復三次對細胞懸浮沖洗步驟非常重要,操作要正確、規范,以達jia效果!
2. 在培養基中加入1%Zell Shield®,抑制支原體增殖!
3. 使用安全的血清、培養基等試劑,不再有新的支原體加入!
只要如法操作,即傳代時(shí)懸浮沖洗,并且用含Zell Shield®的培養基培養細胞四代后,細胞中的支原體即可祛除。希望以上方法能給你帶來(lái)幫助。