支原體PCR驗證用標準品，認準MB產(chǎn)品

支原體PCR方法在上已得到歐洲、日本和美國藥典的承認，它可以取代支原體經(jīng)典藥典方法（如培養法、DNA染色法），但前提是方法需要進(jìn)行驗證。在這方面，國內藥典尚無(wú)明確說(shuō)明，但相關(guān)權wei機構在一些不同場(chǎng)合和法規指南中表示，將逐步與接軌，如果核酸法經(jīng)過(guò)驗證，保證其足夠的靈敏度、特異性和耐用性，則也認可。

國內尚不能大規模推廣核酸法主要有兩個(gè)瓶頸：一是國內缺乏參比標準品。而且支原體是滅活的，級別至少有10CFU，如果再有100CFU則更好。二是企業(yè)仍需要用自己的樣本基質(zhì)進(jìn)行PCR的方法學(xué)驗證，這樣增加了一定的難度。另外，支原體的DNA抽提也是一個(gè)必要的過(guò)程，難以統一化。

事實(shí)上，對支原體PCR或qPCR方法進(jìn)行驗證，除了可參考試劑盒生產(chǎn)廠(chǎng)家自身的驗證外（盡管它不能*替代用戶(hù)自己的驗證，但可提供特異性驗證的一些信息，如使用哺乳動(dòng)物細胞DNA、某些細菌菌屬DNA等，而不必使用者自己再去嘗試），用戶(hù)自己主要是對方法的檢測限和耐用性進(jìn)行驗證，這里常用的就是10CFU支原體標準品。100CFU標準品可作為一個(gè)補充。

德國MB廠(chǎng)家集20多年支原體防控檢測領(lǐng)域的經(jīng)驗，開(kāi)發(fā)有一系列的相關(guān)產(chǎn)品，包括支原體核酸法驗證用標準品。其10CFU標準品為滅活支原體凍干粉形式，經(jīng)精que標定。所用支原體培養基符合歐洲醫藥管理局標準。支原體為滅活形式，不會(huì )帶來(lái)污染，同時(shí)凍干粉又保證了產(chǎn)品的穩定性，不會(huì )受溫度波動(dòng)的影響。

每批支原體都會(huì )提供CFU與基因拷貝數的比值，以方便二者的換算。因為10CFU只能確定PCR能夠達到的檢測限在10CFU以下，但無(wú)法具體確定靈敏度的數值。帶DNA拷貝數標定的基因組DNA標準品則可進(jìn)一步確定檢測限的數值。而且核酸法的終檢測的對象是核酸，而產(chǎn)品的QC主要關(guān)注的是支原體，核酸的存在是側面反映支原體存在的一個(gè)指標。CFU與基因拷貝數的比值很好地對二者進(jìn)行了關(guān)聯(lián)。

MB的支原體標準品批次均經(jīng)廠(chǎng)家QC合格后方能出廠(chǎng)，包括其Ct值達到一定要求。另需注意的是，100CFU標準品不能按倍數稀釋為10CFU標準品。因支原體在液相中不是均一分布，而大多呈集聚狀態(tài)。因此按倍數稀釋后，會(huì )造成支原體量上的偏差。

德國MB的支原體菌株來(lái)自英國菌種保藏中心（NCTC），均有ATCC編號。支原體傳代次數少，發(fā)生突變幾率低。而且經(jīng)廣泛引用和認可，部分如下：

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