隨著(zhù)分子生物學(xué)的發(fā)展,核酸編輯、擴增、測序、鑒定等以核酸為中心的技術(shù)變得越來(lái)越先進(jìn)和方便,尤其是單細胞RNA測序、數字PCR和轉基因技術(shù)的出現,使得核酸技術(shù)應用越來(lái)越廣泛,靈敏度越來(lái)越高。
也但同時(shí)也產(chǎn)生一些弊端,主要是:
1)PCR實(shí)驗造成DNA大量合成,不可避免地給實(shí)驗室帶來(lái)核酸污染。由于核酸產(chǎn)物不能自動(dòng)降解,因此只會(huì )不斷積聚;
2)由于靈敏度升高,少量污染的DNA或RNA分子也會(huì )被檢測出來(lái),從而造成實(shí)驗偏差。
3)核酸污染也給實(shí)驗人員帶來(lái)未知的健康風(fēng)險。
而傳統的紫外照射法對祛除DNA污染并不理想,因為它僅對500bp以上長(cháng)片段有效,對短片段效果不大。
那么,有沒(méi)有一種更好的方法呢?
這里向您推薦一種高效祛除核酸污染的方法,即:使用德國Minerva Biolabs公司(簡(jiǎn)稱(chēng)MB)的PCR污染祛除劑PCR Clean™。
PCR Clean™有噴霧和濕巾兩種樣式,在1分鐘之內即可有效地祛除核酸污染(對質(zhì)粒、基因組和DNA、RNA擴增片段均高度有效),適合各種實(shí)驗臺、操作區域、設備和實(shí)驗耗材,高效迅速,使用方便。
PCR Clean™簡(jiǎn)要介紹如下:
1產(chǎn)品信息(生產(chǎn)商:德國MB公司)
2產(chǎn)品的工作原理
通過(guò)中和降解,快速有效祛除物體表面的DNA、RNA以及DNA酶、RNA酶的污染,確保PCR結果的準確。
3產(chǎn)品特點(diǎn)
①快速有效。1分鐘起效。
②使用方便。使用后用干凈紙巾擦干即可。
③成分安全。非堿性,無(wú)致癌性。
④性能穩定:室溫保存。65°C存放2周,也不影響產(chǎn)品品質(zhì)。
4使用方法
1)實(shí)驗操作臺和常用耗材:將PCR Clean™噴在操作臺或耗材表面,反應1分鐘后,用干凈紙巾擦干即可。
2) 電子設備:用PCR Clean™濕巾擦拭設備表面,反應1分鐘后,用干凈紙巾擦干即可。
3)移液槍?zhuān)喊磸S(chǎng)家說(shuō)明書(shū)從移液槍上拆下套筒。從套筒上取下密封圈和墊片,向套筒充分噴灑PCR Clean™,作用1分鐘后即可用清水沖洗,晾干,再安裝。
說(shuō)明:PCR Clean™ 適用于玻璃、陶瓷、塑料、橡膠、不銹鋼和貴金屬。它不適用于輕金屬和非鐵金屬。
5MB公司對PCR Clean™效果的驗證
MB公司驗證過(guò)PCR Clean™對塑料、玻璃、樹(shù)脂玻璃、鋁等材料上的核酸污染的祛除效果,發(fā)現PCR Clean™對來(lái)自所有檢測表面的DNA擴增片段,質(zhì)粒、基因組DNA和RNA污染的去除,是極為有效的,而且起效很快。去除結果還顯示,和其他常見(jiàn)的DNA清除劑(如乙醇、異丙醇或洗潔精)比較,PCR Clean™的祛除效果和祛除效率都具有顯著(zhù)的優(yōu)勢(見(jiàn)下圖)。
圖:不同清除劑對樹(shù)脂玻璃®(A)、鋁(B)、千思板®(C)、玻璃(D)和塑料薄膜(E)上的大腸桿菌DNA擴增片段去除后,用qPCR進(jìn)行檢測后的擴增曲線(xiàn)。結果顯示,PCR Clean™具有顯著(zhù)的優(yōu)勢。
因此,在PCR反應前后,經(jīng)常使用PCR污染祛除劑PCR Clean™,會(huì )非常便捷,可理想地保持工作區域的清潔,避免核酸污染。同時(shí)節省時(shí)間和支出。而這些給分子生物學(xué)實(shí)驗室和PCR工作臺都會(huì )帶來(lái)非常大的幫助。