神經(jīng)干細胞體外分化研究是神經(jīng)科學(xué)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。
有人觀(guān)察了不同濃度胎牛血清對神經(jīng)干細胞分化的影響。具體做法是:分離大鼠海馬區組織,制成單細胞懸液后,加入適量培養基((含bFGF10 ng/mL、EGF 20 ng/mL HEPES 5 mmol/LHeparin 5mg/mL、葡萄糖23.33 mmol/L、Glutamax3 mmol/L、1%B27的DMEM/F12培養基))培養,并行Nestin染色,陽(yáng)性者為神經(jīng)干細胞。
將第三代神經(jīng)干細胞分為三個(gè)組, A、B、C組細胞培養基除FBS濃度不同(分別為5%、1%、0)外,其余成分均一致(F12、1%N2、1%雙抗、1%谷氨酰胺)。培養第4天和第8天取細胞進(jìn)行觀(guān)察,并采用胞核染色和免疫組化染色,以及檢測GFAP、βIII-Tubulin mRNA表達情況。
結果顯示,培養第4天至第8天,GFAP逐漸減弱,βIII-Tubulin逐漸增強。mRNA結果顯示,在第4天和第8天時(shí),血清濃度越高,GFAP表達越高,βIII-Tubulin表達越低。(參考文獻見(jiàn)《中國修復重建外科雜志》2018年2月第32卷第2期《血清對神經(jīng)干細胞分化的影響》)
GFAP是神經(jīng)膠質(zhì)細胞標記物,βIII-Tubulin是神經(jīng)元標志物。該結果表明,高濃度胎牛血清會(huì )促進(jìn)神經(jīng)干細胞向神經(jīng)膠質(zhì)細胞分化。而如果需要干細胞向神經(jīng)元分化,則需要采用低濃度血清。
關(guān)于胎牛血清的特點(diǎn),下面以Ausbian細胞治療胎牛血清為例,略加說(shuō)明。
該血清系對Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清進(jìn)行γ射線(xiàn)照射,以滅活各種動(dòng)物血清中潛在的病毒風(fēng)險,提高安全性。極利于細胞的生長(cháng)和傳代 。
每個(gè)批號血清均具有完整的檢驗報告,輻照報告。三次0.1 µm無(wú)菌過(guò)濾處理進(jìn)行細菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測,符合動(dòng)物協(xié)會(huì )要求。
Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清內毒素低,小于3Eu/ml,可以使細胞更健康。對于客戶(hù)做實(shí)驗更加順利。如果選取內毒素較高的血清,細胞一直泡在毒液里,短期內試不出結果,用不健康的細胞做實(shí)驗,對實(shí)驗結果造成嚴重影響。
而且同一個(gè)批次數量多,2000瓶,可以長(cháng)期不用換批次。保證了實(shí)驗更加順利的同時(shí),節省了試用的時(shí)間和成本。
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