定期進(jìn)行支原體監測，避免細胞生長(cháng)環(huán)境的污染

支原體在光學(xué)顯微鏡下也無(wú)法看見(jiàn)，它被稱(chēng)為小的細菌。但它沒(méi)有細胞壁，形態(tài)多樣。它可粘附在細胞表面，汲取細胞培養液和細胞內的各種營(yíng)養，嚴重影響細胞代謝和基因表達。

科研中細胞實(shí)驗是chang用的科研手段。由于支原體普遍為人體所攜帶，而且容易在空氣中形成氣溶膠，因此在細胞培養時(shí)，常規應至少一周檢測一次支原體。

支原體檢測有多種方法，如PCR法（含實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)）、恒溫擴增法、DNA染色法、培養法、支原體酶檢測法、ELISA法，以及細胞感應變色法等。

這些方法各有長(cháng)短，有的結果直觀(guān)，有的省時(shí)，有的精que，有的靈敏度高。因此，這些方法應取長(cháng)補短。

其中，設計較好的PCR方法能達到10CFU/ml的檢測限，靈敏度優(yōu)于其他方法，故為藥廠(chǎng)所青睞。PCR方法還有內控對照，可反映檢測過(guò)程是否正常。同時(shí)，PCR方法能覆蓋上百種支原體物種，不容易有假陽(yáng)性和假陰性，操作也較為省事，不用再去培養細胞，因而應用較為多見(jiàn)。

有些PCR方法檢測限能達到20個(gè)基因組拷貝數/PCR反應，也相當靈敏。

Robustness（穩定性或耐用性）也是方法評價(jià)的指標之一，可反映方法的可靠性和得出結果的穩定性。PCR方法也具有較好的穩定性，不受操作過(guò)程的因素波動(dòng)。

PCR檢測細胞上清中的支原體時(shí)，只需2ul就可檢測。如果是用于藥廠(chǎng)的放行檢測，則樣本需加10ul。

圖. 支原體檢測試劑盒(PCR法)

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