背根神經(jīng)節是位于脊椎間孔內、靠近脊髓的神經(jīng)結節。它負責向脊髓傳遞各種感覺(jué)信號,如溫度覺(jué)、觸覺(jué)、痛覺(jué)等。
背根神經(jīng)節細胞的體外培養可用于研究神經(jīng)軸突再生,從而有助于脊髓損傷的治療。
在研究神經(jīng)軸突再生機制時(shí),電穿孔轉染siRNA 或質(zhì)粒是一種重要的研究方法。
對于神經(jīng)元細胞,電傳孔轉染效率顯著(zhù)高于其他方法,但對細胞可能有一定損傷。
2020年9月,《中國組織工程研究》期刊在線(xiàn)發(fā)表了《無(wú)血清培養基和有血清培養基對背根神經(jīng)節生長(cháng)的差異》的研究,揭示出在電轉條件下,血清對背根神經(jīng)節的體外培養有重要作用,因此無(wú)血清培養基無(wú)法取代有血清培養基。
該研究即將刊登在2021年第13期的紙質(zhì)版期刊上。
研究人員取出小鼠的背根神經(jīng)節組織,用膠原酶消化后,分別用含5%胎牛血清的MEM培養基和無(wú)血清的MEM培養背根神經(jīng)節細胞。
同時(shí),用電傳孔方法轉染增強型綠色熒光蛋白(EGFP) 質(zhì)粒至細胞內。
培養3天后,觀(guān)察在光鏡下觀(guān)察細胞形態(tài)及生長(cháng)狀況,并進(jìn)行神經(jīng)元標志物染色,在熒光顯微鏡下觀(guān)察,并測量軸突長(cháng)度。
結果顯示:
1、在電轉和非電轉條件下,無(wú)血清并不影響背根神經(jīng)節細胞的軸突再生的長(cháng)度和軸突的分支。
2、在電轉的條件下,背根神經(jīng)節神經(jīng)元的存活數均減少,且電轉無(wú)血清組的細胞存活數比電轉有血清組明顯減少。
3、無(wú)論是否有血清,電傳孔傳染效率均為20%左右。
該研究揭示出,電轉對神經(jīng)細胞存在一定的損傷,但血清對細胞有明顯的保護作用。該結論也可能適用于其他細胞類(lèi)型。
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