細胞分裂過(guò)程中染色體的不正確分布會(huì )帶來(lái)災難性的后果

日本筑波-染色體形式的DNA是生命的基本組成部分，這已不是什么秘密。細胞分裂過(guò)程中染色體的不正確分布會(huì )帶來(lái)災難性的后果。不平衡的染色體拷貝或非整倍性是腫瘤的標志，并影響包括人類(lèi)在內的所有生物的發(fā)育和存活。

 

細胞如何傳播遺傳物質(zhì)已經(jīng)使研究人員著(zhù)迷了幾個(gè)世紀。在2020年6月發(fā)表于《核酸研究》上的一項研究中，筑波大學(xué)的研究人員在木村敬二副教授的帶領(lǐng)下，確定了一種新的蛋白質(zhì)復合體NWC，它參與了染色體的分布。

NWC與核仁(一種無(wú)膜的核內結構)相關(guān)，并在細胞分裂過(guò)程中重新定位到染色體的外圍。這種蛋白質(zhì)復合物包含三種不同的蛋白質(zhì)：1，WDR43和Cirhin。1通常與核仁相關(guān)，而WDR43和Cirhin是WD重復蛋白。木村副教授說(shuō)：“這項研究很重要，因為迄今為止，核仁蛋白的有絲分裂功能尚未得到充分表征。”

該團隊使用免疫熒光技術(shù)檢測了1在人細胞中的定位。使用專(zhuān)門(mén)的顯微鏡，蛋白質(zhì)的位置可以通過(guò)其“發(fā)光”顯示出來(lái)。他們發(fā)現，1在有絲分裂或核分裂過(guò)程中位于染色體的外圍。木村副教授解釋說(shuō)：“當我們檢查1蛋白時(shí)，我們意識到它沒(méi)有任何功能性基序。然后，我們探索了它可能與其他蛋白復合的功能。”

使用先進(jìn)的分子技術(shù)，研究團隊確定了NWC復合物并對其進(jìn)行了表征。他們檢查了從復合物中去除單個(gè)蛋白質(zhì)的效果，發(fā)現NWC定位于染色體并在有絲分裂中起作用需要所有三個(gè)組件。減少細胞中NWC的量會(huì )導致細胞周期進(jìn)程不*，從而導致染色體無(wú)法分離，錯位，以及準確的染色體分布所需的蛋白質(zhì)的位置和濃度存在缺陷，包括Aurora B，粘著(zhù)蛋白復合物和組蛋白H3磷酸化。

Kimura副教授及其同事提出的結果表明，NWC通過(guò)允許Aurora B在著(zhù)絲粒處積累(部分通過(guò)調節組蛋白磷酸化)而在有絲分裂染色體穩定性中發(fā)揮特定作用。NWC如何控制著(zhù)絲粒附近的組蛋白磷酸化仍有待確定。

鑒于正確的染色體傳播對于生命和疾病的預防至關(guān)重要，因此這些結果可能會(huì )成為尋找基因的新焦點(diǎn)，這些基因突變后會(huì )導致非整倍性或染色體拷貝失衡。

血清的熱滅活是很多培養者感興趣的話(huà)題，價(jià)格不菲的血清中含有諸如生長(cháng)因子，維生素，氨基酸等珍貴物質(zhì)，而將它們置于50℃以上的溫度長(cháng)達30分鐘是*沒(méi)有必要的。盡管如此，在大多數實(shí)驗室之中血清的熱滅活還是作為常規來(lái)執行，多數實(shí)驗者并沒(méi)有考慮熱處理對血清中的生長(cháng)因子、氨基酸等成分帶來(lái)的負面影響，在我們的技術(shù)熱線(xiàn)中常常被提到的就是“是否該對血清進(jìn)行熱滅活”，下面我們就對胎牛血清的熱滅活進(jìn)行一些探討和解釋。

 

血清熱滅活操作步驟

編輯

①選用與血清瓶同規格的對照瓶一個(gè)。

②對照瓶?jì)确湃肱c血清等體積的水。

③溫度預試。

對照瓶?jì)炔迦?—3支經(jīng)挑選的溫度計(保證測試溫度的準確性)，放入水浴箱中，接通電源，調節溫度控制鈕，使水浴箱溫度所示溫度保持在56℃。

④血清滅活。

血清瓶與帶溫度計的對照瓶一齊放入水浴箱中，待溫度計所示溫度上升至56℃時(shí)， 定時(shí)30分鐘。

⑤大瓶血清滅活后，進(jìn)行分裝。

⑥保存。

分裝后，抽樣做無(wú)菌試驗，－20～－70℃保存。