胎牛血清中的外泌體參與細胞的增殖

外泌體（Exosome）是近年研究的熱點(diǎn)，它是新發(fā)現的一種細胞通訊的形式。外形上看，它是30-150nm的小囊泡，里面卻攜帶著(zhù)多種蛋白質(zhì)、RNA和脂類(lèi)等重要信息。

它由活細胞分泌，進(jìn)入到血清、唾液、尿液、羊水等多種生物體液中，進(jìn)而影響鄰近或遠處的細胞。

 

圖. 外泌體作為一種小囊泡，參與細胞間的通訊。

圖片來(lái)自：Graça Raposo.Extracellular vesicles: Exosomes, microvesicles, and friends.J Cell Biol. 2013 Feb 18; 200(4): 373–383

胎牛血清是常用的細胞培養基添加成分，它富含多種營(yíng)養，滿(mǎn)足細胞粘附、生長(cháng)、增殖、解毒等需求。胎牛血清中也含有外泌體，并可能對所培養細胞具有一定作用。

2020年，有文獻報道了胎牛血清外泌體對成骨細胞的增殖起促進(jìn)作用，則確證了血清中的外泌體確實(shí)在細胞培養中發(fā)揮一定的作用。（文獻1）

該實(shí)驗的研究設計如下：

一、外泌體的提取和確證

取15 mL胎牛血清，通過(guò)超速離心100000xg獲得外泌體，0.22μm過(guò)濾清洗后，將外泌體溶于100μlPBS中。并進(jìn)行透射電子顯微鏡觀(guān)察，以及后期WB檢測標志蛋白確證。

二、細胞培養

小鼠胚胎成骨前體細胞MC3T3-E1細胞，前期用含10%胎牛血清的α-MEM培養液培養，傳代。選取狀態(tài)良好的第3代細胞用于后續實(shí)驗。

三、細胞分組培養

對照組：胎牛血清（不含外泌體）+ α-MEM

外泌體組：在以上基礎上另加入10 mg/L胎牛血清外泌體。

四、細胞檢測

用CCK-8檢測細胞增殖，WB檢測細胞骨形態(tài)發(fā)生蛋白2、骨橋蛋白。

結果顯示，24h后，外泌體組細胞增殖明顯高于對照組。同時(shí)，促進(jìn)成骨的蛋白因子，如骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和骨橋蛋白的表達水平明顯增高。

作者指出：胎牛血清外泌體對成骨細胞的增殖起到促進(jìn)作用，可為臨床治療骨破壞提供新思路。同時(shí)，國外的研究表明，使用祛除外泌體的胎牛血清培養細胞，大多數細胞的生長(cháng)速率均降低，提示血清中的外泌體在細胞生長(cháng)及存活方面起到一定的作用（文獻2）。

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2. 極利于細胞的生長(cháng)與傳代，適合各類(lèi)細胞培養。

3. 每個(gè)批號血清均具有完整的檢驗報告。

4. 七次無(wú)菌過(guò)濾，后三次為0.1μm無(wú)菌過(guò)濾處理。

5. 進(jìn)行細菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測，符合動(dòng)物協(xié)會(huì )要求。

6. 每批次產(chǎn)量為1500瓶-2500瓶，保證大多數項目?jì)赡瓴恍钃Q批次，細胞試驗數據穩定。