外泌體(Exosome)是近年研究的熱點(diǎn),它是新發(fā)現的一種細胞通訊的形式。外形上看,它是30-150nm的小囊泡,里面卻攜帶著(zhù)多種蛋白質(zhì)、RNA和脂類(lèi)等重要信息。
它由活細胞分泌,進(jìn)入到血清、唾液、尿液、羊水等多種生物體液中,進(jìn)而影響鄰近或遠處的細胞。
圖. 外泌體作為一種小囊泡,參與細胞間的通訊。
圖片來(lái)自:Graça Raposo.Extracellular vesicles: Exosomes, microvesicles, and friends.J Cell Biol. 2013 Feb 18; 200(4): 373–383
胎牛血清是常用的細胞培養基添加成分,它富含多種營(yíng)養,滿(mǎn)足細胞粘附、生長(cháng)、增殖、解毒等需求。胎牛血清中也含有外泌體,并可能對所培養細胞具有一定作用。
2020年,有文獻報道了胎牛血清外泌體對成骨細胞的增殖起促進(jìn)作用,則確證了血清中的外泌體確實(shí)在細胞培養中發(fā)揮一定的作用。(文獻1)
該實(shí)驗的研究設計如下:
一、外泌體的提取和確證
取15 mL胎牛血清,通過(guò)超速離心100000xg獲得外泌體,0.22μm過(guò)濾清洗后,將外泌體溶于100μlPBS中。并進(jìn)行透射電子顯微鏡觀(guān)察,以及后期WB檢測標志蛋白確證。
二、細胞培養
小鼠胚胎成骨前體細胞MC3T3-E1細胞,前期用含10%胎牛血清的α-MEM培養液培養,傳代。選取狀態(tài)良好的第3代細胞用于后續實(shí)驗。
三、細胞分組培養
對照組:胎牛血清(不含外泌體)+ α-MEM
外泌體組:在以上基礎上另加入10 mg/L胎牛血清外泌體。
四、細胞檢測
用CCK-8檢測細胞增殖,WB檢測細胞骨形態(tài)發(fā)生蛋白2、骨橋蛋白。
結果顯示,24h后,外泌體組細胞增殖明顯高于對照組。同時(shí),促進(jìn)成骨的蛋白因子,如骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和骨橋蛋白的表達水平明顯增高。
作者指出:胎牛血清外泌體對成骨細胞的增殖起到促進(jìn)作用,可為臨床治療骨破壞提供新思路。同時(shí),國外的研究表明,使用祛除外泌體的胎牛血清培養細胞,大多數細胞的生長(cháng)速率均降低,提示血清中的外泌體在細胞生長(cháng)及存活方面起到一定的作用(文獻2)。
明星產(chǎn)品:Ausbian®特級胎牛血清
Ausbian®特級胎牛血清被各大科研院所、高校重點(diǎn)實(shí)驗室及藥廠(chǎng)廣泛使用,多年來(lái)持續穩定供應細胞典藏等重大項目。
產(chǎn)品描述:
1. 內毒素含量極低(≤3EU/ml)(規定:特級胎牛血清<10EU/ml)。
2. 極利于細胞的生長(cháng)與傳代,適合各類(lèi)細胞培養。
3. 每個(gè)批號血清均具有完整的檢驗報告。
4. 七次無(wú)菌過(guò)濾,后三次為0.1μm無(wú)菌過(guò)濾處理。
5. 進(jìn)行細菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測,符合動(dòng)物協(xié)會(huì )要求。
6. 每批次產(chǎn)量為1500瓶-2500瓶,保證大多數項目?jì)赡瓴恍钃Q批次,細胞試驗數據穩定。