細胞培養之：如何從血清檢測指標評價(jià)優(yōu)質(zhì)血清

牛血清是目前細胞培養中用量最大的天然培養基，含有豐富的、細胞生長(cháng)必需的營(yíng)養成分，具有極為重要的功能。

要保證血清質(zhì)量，需要有嚴格的質(zhì)控，包括從外觀(guān)到理化性質(zhì)、細胞增殖試驗和微生物檢查，制定一系列的標準，以及出廠(chǎng)產(chǎn)品能符合這些標準。

一、外觀(guān)及相關(guān)物質(zhì)含量

 

以胎牛血清為例，優(yōu)質(zhì)的特級胎牛血清，外觀(guān)應是淡棕色至橙色透明液體，無(wú)顆粒物沉淀。

PH在6.7-8.2之間；

滲透壓在260-340mosm/kg之間；

血紅蛋白含量小于20mg/dL；

總蛋白含量在30-50g/L；

白蛋白含量在14-34g/L；

α、β、γ球蛋白含量則以實(shí)際測量為準；

IgG應小于250μg/mL；

內毒素含量應小于3EU/mL;

內毒素直接參與細胞凋亡，血清中內毒素含量越低，對細胞毒性越小，越利于細胞的生長(cháng)和傳代

二、無(wú)菌檢測

 

優(yōu)質(zhì)的特級胎牛血清還要經(jīng)過(guò)嚴格的無(wú)菌檢測。確保血清無(wú)污染。

檢測項目包括厭氧菌、好氧菌、真菌（最容易污染細胞的酵母菌和霉菌都應包括在內）以及支原體檢測。檢測結果應全部為陰性，視為通過(guò)無(wú)菌檢測。

三、病毒檢測

 

血清含有bing毒，會(huì )導致宿主細胞發(fā)生腫脹、壞死、脫壁，不僅嚴重影響實(shí)驗進(jìn)度，更可能會(huì )對實(shí)驗人員造成威脅。

對于血清中的病毒檢測，重點(diǎn)放在那些曾世界大范圍爆發(fā)、人畜共患或是十分常見(jiàn)的病毒身上。

每個(gè)地區的法規會(huì )有些許區別，但牛副流感3型病毒（PI-3）、牛腹瀉病毒（BVD）、牛細小病毒等是任何國家和地區的檢測報告中，都應標注清楚的。

一批合格的血清，所有bing毒檢測項目均應為陰性。

四、細胞生長(cháng)情況

 

促進(jìn)細胞增殖方面，也是血清一項不可忽視的指標。每一批次血清也應就克隆率、細胞毒性、細胞增殖密度、和倍增時(shí)間進(jìn)行檢查。

所有檢測結果應符合相應的規范。

五、抗體檢測

 

病毒檢測反映的是動(dòng)物采血時(shí)、或血清加工過(guò)程中有沒(méi)有感染病毒，而抗體檢測則表示該供體動(dòng)物在采血前一段時(shí)間內，是否感染過(guò)病毒。

優(yōu)質(zhì)的特級胎牛血清，應保證動(dòng)物從始至終都沒(méi)有感染過(guò)相關(guān)病毒，因此檢測結果應為陰性。

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