1981年Kaufman等人[1]直接從小鼠囊胚的ICM 中成功獲得多潛能的胚胎干細胞(ES細胞)以來(lái),自此之后,人們先后從豬、牛、兔等動(dòng)物體內,分離得到ES細胞或類(lèi)ES細胞系。
隨后的研究中,Thomsom 等人[2]建立了人類(lèi)胚胎細胞系,科學(xué)家們開(kāi)始關(guān)注于胚胎細胞的定向誘導分化,希望通過(guò)這類(lèi)研究為治療退行性疾病提供組織、器GUAN移植的原材料。顯然,干細胞的體外培養是進(jìn)行上述各項研究的前提與基礎。在干細胞的體外培養方面,培養基是其賴(lài)以生存的環(huán)境,哪怕是極微小的變化都會(huì )影響干細胞的增殖和分化[3]。
在隨后的研究中,科研人員發(fā)現,干細胞具有兩個(gè)特性:自我更新的能力以及多向分化的潛能。在體外培養時(shí),實(shí)驗人員需要盡可能利用各種培養條件,維持干細胞的這兩大特性。因此要求ES細胞培養基中,除了一般體外培養所用到的基礎培養基,還應添加血清、LIF、β-巰基乙醇,L-谷氨酰胺等成分,隨后有發(fā)展出飼養層培養等方法,各種干細胞專(zhuān)用培養基、條件培養基也相繼問(wèn)世[4],豐富了干細胞培養方法與流程。
但目前市場(chǎng)上,干細胞培養專(zhuān)用的試劑盒,其中培養基和細胞因子價(jià)格高昂,使得培養成本大大增加,而且實(shí)際操作過(guò)程往往需要配合飼養層來(lái)培養,周期長(cháng),步驟繁瑣,對實(shí)驗者有較高的技術(shù)要求,因此很多實(shí)驗室培養干細胞的效果并不理想。
參考文獻:
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