干細胞培養的發(fā)展歷程

1981年Kaufman等人[1]直接從小鼠囊胚的ICM 中成功獲得多潛能的胚胎干細胞（ES細胞）以來(lái)，自此之后，人們先后從豬、牛、兔等動(dòng)物體內，分離得到ES細胞或類(lèi)ES細胞系。

隨后的研究中，Thomsom 等人[2]建立了人類(lèi)胚胎細胞系，科學(xué)家們開(kāi)始關(guān)注于胚胎細胞的定向誘導分化，希望通過(guò)這類(lèi)研究為治療退行性疾病提供組織、器GUAN移植的原材料。顯然，干細胞的體外培養是進(jìn)行上述各項研究的前提與基礎。在干細胞的體外培養方面，培養基是其賴(lài)以生存的環(huán)境，哪怕是極微小的變化都會(huì )影響干細胞的增殖和分化[3]。

在隨后的研究中，科研人員發(fā)現，干細胞具有兩個(gè)特性：自我更新的能力以及多向分化的潛能。在體外培養時(shí)，實(shí)驗人員需要盡可能利用各種培養條件，維持干細胞的這兩大特性。因此要求ES細胞培養基中，除了一般體外培養所用到的基礎培養基，還應添加血清、LIF、β-巰基乙醇，L-谷氨酰胺等成分，隨后有發(fā)展出飼養層培養等方法，各種干細胞專(zhuān)用培養基、條件培養基也相繼問(wèn)世[4]，豐富了干細胞培養方法與流程。

但目前市場(chǎng)上，干細胞培養專(zhuān)用的試劑盒，其中培養基和細胞因子價(jià)格高昂，使得培養成本大大增加，而且實(shí)際操作過(guò)程往往需要配合飼養層來(lái)培養，周期長(cháng)，步驟繁瑣，對實(shí)驗者有較高的技術(shù)要求，因此很多實(shí)驗室培養干細胞的效果并不理想。

參考文獻：

［1］ Evans M J，Kaufman M H．Establishment in culture of plurpotential cells from mouse embryos ［J］．Nature， 1981，292：154-156．

［2］ T homson J A，Itskovits-elder J S，Shapiro S S，et al． Embryonic stem cell lines derived from human blastocysts［J］．Science，1998，282（5391） ：1145-1148．

［3］ 楊 奇．胚胎干細胞的分離克?。跩］．西北農林科技大 學(xué)學(xué)報（ 自然科學(xué)版） ，2001，29（3） ：120-124．

［4］ 郭志林，王新莊，衛 木，等．影響昆明小鼠和 BALB／c 小鼠胚胎干細胞分離、克隆、傳代的若干因素［J］．中 國獸醫學(xué)報，2006，26（4） ：448-450．