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血清為什么滅活菌

更新時(shí)間:2022-10-15  |  點(diǎn)擊率:650

何為熱滅活?

經(jīng)常使用血清作為添加劑來(lái)培養細胞的小伙伴,對熱滅活應該都不陌生。

一般情況下,血清的滅活是指解凍后的血清,通過(guò)水浴加熱的方式,將其加熱至56℃維持30分鐘,或者40℃維持20分鐘,以達到滅活補體的目的。

補體是什么?

既然熱滅活的主要針對補體,那么我們就要搞清楚補體的是什么?有哪些基本的功能?

什么是補體?

補體是廣泛存在于人和脊椎動(dòng)物體血清及組織液中,不耐熱,活化后具有酶活性、可介導免疫應答和炎癥反應的一類(lèi)蛋白質(zhì)。

補體的基本功能

補體系統可通過(guò)3條既相對獨立又相互聯(lián)系的途徑被激活,從而發(fā)揮生理作用。

包括但不限于調理吞噬、裂解細胞、介導炎癥、免疫調節和清除免疫復合物等多種生物學(xué)效應,包括增強吞噬作用,增強吞噬細胞的趨化性;增加血管的通透性;中和病毒;細胞溶解作用;免疫反應的調節作用;刺激平滑肌收縮、細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。

血清是否均需要熱滅活?

血清的最佳工作溫度一般是在37℃左右,所以熱滅火對于血清而言,也是一種不小的傷害,會(huì )導致一些營(yíng)養成分流失,進(jìn)而影響細胞狀態(tài)。

但如果所用血清中含有補體,且所培養的細胞、所涉及的實(shí)驗對補體相關(guān)的蛋白較為敏感,建議進(jìn)行熱滅活處理。

胎牛血清

正規的胎牛血清,要求對5-8月胎齡(一般牛在10個(gè)月左右足月,后自然分娩)的胎牛采用心臟穿刺的方法采血,隨后進(jìn)行其他制備步驟,得到胎牛血清。

因此:

靠譜的胎牛血清,沒(méi)有形成一個(gè)完整的補體系統,不會(huì )真正地干預免疫!

非胎牛血清

新生牛血清、小牛血清、成牛血清、馬血清、豬血清這類(lèi)動(dòng)物血清,一般采集自補體系統發(fā)育*的供體,因此,如果涉及以下幾個(gè)方向(包括但不限于)建議合理熱滅活。

1、免疫學(xué)研究

2、誘導胚胎干細胞分化

3、利用昆蟲(chóng)細胞研究病毒感染

4、培養平滑肌細胞

5、其他補體參與的細胞培養過(guò)程


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