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讓人頭疼的支原體污染如何去除(普通細胞)?

更新時(shí)間:2022-10-19  |  點(diǎn)擊率:511

細胞污染支原體,是令細胞培養相關(guān)從業(yè)者十分頭疼的問(wèn)題。細胞感染了支原體又不愿丟棄怎么辦?本系列內容分情況為大家解答。

01

普通細胞支原體祛除

適用范圍

對于費力擴增的細胞(如已轉染,或經(jīng)過(guò)體外刺激),如果細胞中發(fā)現有支原體污染,但此細胞又不愿丟棄,希望繼續培養,推薦使用MB公司生產(chǎn)的復合抗生素Zell Shield®。

02

Zell Shield®特點(diǎn)

·特點(diǎn)

  • 高效廣譜:Zell Shield®通過(guò)阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過(guò)程中DNA及蛋白的合成,有效抑制上述微生物的增殖。

  • 安全:無(wú)細胞毒性,采用復合支原體敏感抗生素,對大多數細胞株無(wú)毒。

  • 活性穩定:在細胞培養期間,Zell Shield®始終保持穩定的活性。

  • 使用方便:Zell Shield®為無(wú)菌溶液,可直接加入培養基使用。

03

Zell Shield®使用方法

使用方法

(1)在每次使用Zell Shield®之前,細胞傳代時(shí),先使用廠(chǎng)家推薦的“懸浮沖洗法”處理好細胞,再使用加了Zell Shield®的培養基養細胞,能達到*佳的祛除支原體的效果。

(2)Zell Shield®常規為-18℃保存,建議使用前,先融化分裝,仍舊-18℃避光保存,使用時(shí)按需融化配置。避免反復凍融。

(3)Zell Shield®按1:100濃度可直接加入培養基。例如:500ml培養基中添加5ml Zell Shield®,50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培養基使用。

什么是懸浮沖洗法

據研究表明,約98%的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。細胞傳代時(shí),用干凈的PBS反復懸浮沖洗,就能把70%以上的支原體沖下來(lái)。

支原體直徑在180~350nm之間,遠遠小于細胞直徑。通過(guò)低速離心,很容易將細胞和支原體分離,棄上清即可祛除大部分支原體。

簡(jiǎn)要步驟

消化細胞

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離心

?

棄上清

?

PBS清洗細胞

?

低速離心棄上清

重復清洗3次

?

加入含有Zell Shield®的

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