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「細胞支原體污染」的綜合治理方案

更新時(shí)間:2022-11-22  |  點(diǎn)擊率:479

在疫苗生產(chǎn)、生物制藥和細胞培養試驗中,支原體污染的預防和祛除,是保證生產(chǎn)質(zhì)量和實(shí)驗順利的重要環(huán)節。

Minerva Biolabs

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德國MB

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眾多的大型生物藥廠(chǎng)以及數不過(guò)來(lái)的生物實(shí)驗室,預防、檢測,祛除支原體的產(chǎn)品,都更青睞MB公司的相關(guān)產(chǎn)品。

本期內容,我們將把MB品牌的『環(huán)境中支原體祛除、細胞中支原體檢測與祛除』產(chǎn)品,簡(jiǎn)明扼要地介紹給大家,希望對疫苗生產(chǎn)、生物制藥、細胞治療、CAR-T等項目的質(zhì)檢質(zhì)控,以及更多實(shí)驗室的科研工作者,能有所幫助。

環(huán)境中

支原體祛除

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德國MB

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實(shí)驗環(huán)境中,支原體的祛除方法有很多。

但實(shí)際操作過(guò)程中,還是使用支原體專(zhuān)用清除噴霧或濕巾,更加高效、安全和便捷。

德國MB公司的Mycoplasma-off™可以算是“業(yè)界頂流”,有以下幾個(gè)特點(diǎn):

(1)快速有效

噴霧劑中含有支原體專(zhuān)用殺除劑Mynox®,可在幾分鐘內迅速殺除支原體。

(2)廣譜抗菌

不僅能祛除支原體,而且能有效祛除葡萄球菌、腸球菌、大腸桿菌、奇異變形桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、牛腹瀉病毒、腺病毒、多瘤病毒、鼠諾如病毒、牛痘病毒、真菌孢子等。

(3)無(wú)腐蝕性和致癌性

乙醇作為溶劑,無(wú)腐蝕性和致癌性成分

(4)操作簡(jiǎn)便

即用型消毒液,可以快速簡(jiǎn)單地保持工作區的清潔干凈。噴霧劑噴灑待消毒的表面,等待5-10min后,用干凈紙巾擦拭。無(wú)菌通風(fēng)2-3分鐘。

對于水浴鍋、培養箱水槽等環(huán)境,可以選擇Water Shield™對其進(jìn)行處理。與其他抑菌類(lèi)產(chǎn)品相比,有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn):

  • 長(cháng)效:Water ShieldTM含表面活性劑、季銨鹽和絡(luò )合劑,不易揮發(fā),可持續作用4周。

  • 安全:不含醛類(lèi)或疊氮化物,對細胞無(wú)毒害。

  • 廣譜:預防支原體、細菌、真菌、霉菌、孢子污染。

  • 方便:Water ShieldTM按1:200比例,直接加入水中,使用方便。

  • 不產(chǎn)生水垢。

細胞中

支原體檢測

 

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德國MB

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要想準確判斷細胞是否被支原體污染,光靠觀(guān)察法是遠遠不夠的,靈敏度更高、特異性更強、耗時(shí)短、操作便捷的PCR法則是更好的選擇。其中,qPCR和常規PCR分別有其不同的適用場(chǎng)景及特點(diǎn)。

qPCR檢測

更適合疫苗等工業(yè)生產(chǎn)用戶(hù)使用,主要用到Venor®Gem qEP支原體檢測試劑盒。該檢測試劑盒有以下幾個(gè)特點(diǎn):

1、遵循歐洲藥典和日本藥典操作流。

2、高特異性,一次檢測即可涵蓋所有常見(jiàn)易感染細胞的支原體物種(包括歐洲藥典規定的9種支原體)。與細菌和真核DNA無(wú)交叉反應。

3、高靈敏度,zui低檢測限可達到≤10CFU/ml。

4、相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA,便于特異性驗證。

5、有相應配套的支原體絕對定量標準品,便于最后定量檢測。

常規PCR檢測

如果僅是實(shí)驗室日??蒲羞^(guò)程中使用,無(wú)需對支原體進(jìn)行定量檢測,則可以選擇Venor® Gem Classic支原體常規PCR檢測試劑盒。

該試劑盒高特異性,僅一條陽(yáng)性對照條帶,即可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種。操作簡(jiǎn)單,易于觀(guān)察。且覆蓋面廣,歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無(wú)膽甾原體和85種支原體,與細胞和真核DNA無(wú)交叉反應。

細胞中

支原體祛除

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德國MB

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一般情況下,細胞感染支原體,我們建議直接丟棄并對環(huán)境進(jìn)行消毒處理,但總有一些特殊情況,導致我們愿意丟棄辛苦培養的細胞,這時(shí)就可以派細胞用支原體祛除試劑上場(chǎng)了。

Mynox®

對于無(wú)法長(cháng)期培養的珍貴樣本或病毒收獲液,則推薦使用德國MB公司的Mynox® 。含有「治療液」和「鞏固防護液」。

「治療液」來(lái)自枯草桿菌提取物,可特異性地與支原體膜結合,改變支原體膜通透性,從而使支原體在2-3小時(shí)內破潰死亡。

「鞏固防護液」加入培養基,后續培養一個(gè)月,細胞將會(huì )清除支原體的污染,確切有效。

Mynox® Gold

若是可以培養超過(guò)一個(gè)月的細胞,則推薦使用德國MB公司的Mynox® Gold,直接殺除+鞏固防護兩步處理,祛除支原體的同時(shí),可進(jìn)一步在后續培養中鞏固清除效果,防止支原體“卷土重來(lái)”。

Zell Shield®

適合細胞已發(fā)生支原體污染,但又不愿丟棄,希望繼續培養:如已轉染或大量擴增的細胞的情況。復合抗生素成分,抑制支原體蛋白和DNA合成,也抑制細菌和真菌。

先使用廠(chǎng)家推薦的“懸浮沖洗法”處理好細胞,再使用加了Zell Shield®的培養基養細胞,能達到更好的祛除支原體的效果。

 

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