抗生素在細胞培養中究竟是敵是友？

提到配制細胞培養基，你能想到啥？

營(yíng)養成分和緩沖體系多數情況下都是必要的，但這抗生素，真的是必要的嗎？有了抗生素，細胞就無(wú)懼污染了嗎？

關(guān)于抗生素在細胞培養過(guò)程中的意義，一直都有很矛盾，不用細胞容易污染，一直用對細胞狀態(tài)也會(huì )有影響，到底該怎么辦？今天我們就來(lái)一探究竟。

抗生素對細胞的影響

很多同學(xué)養細胞的手藝，都是從師兄師姐那里「傳承」來(lái)的，由于沒(méi)有辦法做到絕對的無(wú)菌，所以從經(jīng)驗角度出發(fā)，前輩們都會(huì )告訴剛開(kāi)始養細胞的同學(xué)，可以在配制培養基的時(shí)候，加入1%左右的雙抗，防止細胞出現細菌污染（有些時(shí)候甚至出現離開(kāi)抗生素，細胞沒(méi)過(guò)幾天立馬就被污染的情況）。

這就造成一些小伙伴在培養基中「預防性添加抗生素」，其實(shí)圖的就是個(gè)心安，抱著(zhù)「有了抗生素就不怕污染」的心態(tài)。但事實(shí)上，抗生素并不能一勞永逸，真菌、支原體這些污染是它不能夠對抗的，甚至濫用還會(huì )適得其反。

這抗生素對細胞有什么影響呢？

早在十幾年前，就有很多報導指出β-內酰胺類(lèi)抗生素及氨基糖甙類(lèi)抗生素，對真核細胞培養有抑制增殖作用[1]。并且這種抑制增殖作用在原代細胞和干細胞等難養細胞上尤其明顯[2-3]。2017年，加州大學(xué)Nadav Ahituv博士在Scientific Reports上發(fā)表文章，呼吁在細胞培養過(guò)程中減少抗生素的使用[4]。他們發(fā)現抗生素（雙抗：青霉素和鏈霉素）的使用影響人體肝細胞中基因表達與基因調控。其中有209個(gè)基因的表達發(fā)生了改變，特別是與藥物和應激反應相關(guān)的基因。超過(guò)9,500個(gè)基因調控元件發(fā)生了變化，并且很多調節元件位于參與細胞分化，核酸酶活性和tRNA修飾的基因附近。雖然這些基因的數量在龐大的細胞基因庫中不值一提，但這絕對不是一個(gè)應該被忽略的事件。

雖然抗生素對真核細胞生長(cháng)的影響機制至今尚未明確，但是為了細胞更好的生長(cháng)，實(shí)驗結果更加準確，實(shí)驗數據更加穩定，在實(shí)驗過(guò)程中盡量不要隨意使用。

參考文獻：

[1] KA Neftel, Hubscher, U. Effects of beta-lactam antibiotics on proliferating eucaryotic cells.[J]. Antimicrobial Agents & Chemotherapy, 1987, 31(11):1657-61.

[2] Varghese D S , Parween S , Ardah M T , et al. Effects of Aminoglycoside Antibiotics on Human Embryonic Stem Cell Viability during Differentiation In Vitro[J]. Stem Cells Int, 2017, 2017:1-18.

[3] Nygaard U H , Niehues H , Rikken G , et al. Antibiotics in cell culture: friend or foe? Suppression of keratinocyte growth and differentiation in monolayer cultures and 3D skin models[J]. Experimental Dermatology, 2016, 24(12):964-965.

[4] Ryu A H , Eckalbar W L , Kreimer A , et al. Use antibiotics in cell culture with caution: genome-wide identification of antibiotic-induced changes in gene expression and regulation[J]. Scientific Reports, 2017, 7(1):7533.

如何有效避免污染？

抗生素對細胞有一定傷害，但是不加抗生素又要怎樣避免實(shí)驗出現污染的狀況呢？

1、實(shí)驗環(huán)境（包括培養箱內部、冰箱、超凈臺）要進(jìn)行定期的消毒，用消毒液（75%乙醇溶液、新潔爾滅等）擦拭地面墻面桌面等地方，不留衛生死角；紫外線(xiàn)照射30分鐘以上。

2、定期用支原體祛除試劑清潔超凈臺臺、桌面等地方。

點(diǎn)擊下方圖片了解更多商品詳情

3、培養箱、水浴鍋的水槽要定期清潔，用支原體預防試劑處理。

4、細胞房實(shí)驗要用專(zhuān)用的實(shí)驗服：進(jìn)入細胞房正式實(shí)驗前須換上專(zhuān)用防護服、專(zhuān)用鞋或鞋套。

5、實(shí)驗廢料不在細胞房堆積，及時(shí)清理。

6、遵照細胞實(shí)驗操作方法，實(shí)驗過(guò)程中嚴格無(wú)菌操作。

另外，選擇一款合格的實(shí)驗試劑也很重要。就拿血清來(lái)說(shuō)，合格的血清產(chǎn)品，一定要有明確的檢測報告，指出微生物檢測情況。

以Ausbian血清為例：各項指標均符合要求。

Ausbian血清的優(yōu)勢

1. 精選內毒素更低批次（≤3EU/ml）。是細胞典藏等重大項目十幾年的穩定供應品牌。

2. 新批次在試用前，提供試用服務(wù)，養細胞更放心。

3. 每個(gè)批次產(chǎn)量800-2000升，試用滿(mǎn)意的實(shí)驗室批號優(yōu)先鎖定，保證大多數項目?jì)赡瓴恍钃Q批次，細胞試驗數據穩定。

4. 每年按廠(chǎng)家生產(chǎn)順序，會(huì )有多批次平行供應，每個(gè)實(shí)驗室專(zhuān)屬批號管理，保證供貨穩定。

所有血清出廠(chǎng)前，均經(jīng)過(guò)嚴格質(zhì)控，每個(gè)批次附有詳細完整的《檢測報告》，包括：品名，貨號，批號，血源地，生產(chǎn)日期，保質(zhì)期，pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內毒素、無(wú)菌檢查（細菌、真菌、支原體）、病毒檢查（如BVD、牛腺病毒、細胞病變效應等）、促細胞生長(cháng)能力、細胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。

5. 為Ausbian血清用戶(hù)免費提供申報支持，具有完整的檢測報告，為各類(lèi)項目的申報提供支持（同時(shí)為血清VIP用戶(hù)在支原體檢測、方法學(xué)驗證等方面，提供更多免費延伸性技術(shù)幫助）。

6. 針對特殊科研項目，可提供3-5個(gè)平行批次，讓試驗人有更多選擇空間。

7. 為Ausbian血清提供免費代儲存服務(wù)，為儲存空間不足的實(shí)驗室提供可靠的血清倉儲保護，按要求隨時(shí)發(fā)貨。

8. Ausbian血清從出廠(chǎng)，到實(shí)驗室，全程低溫冷鏈保護，確保血清無(wú)反復凍融。

9. 免費真品保障，每個(gè)血清瓶身加貼Viansaga®易破損防偽標簽，Ausbian品牌真品保護，逢假必究，為實(shí)驗室做好售后保障。

10. 免費無(wú)憂(yōu)售后，所有實(shí)驗室簽收的Ausbian胎牛血清，從簽收日開(kāi)始計算，一年之內，血清在妥善保管、未開(kāi)封未融化、且不影響二次銷(xiāo)售的情況下，均可享受無(wú)條件退貨或換貨的售后保障。

11. 免費專(zhuān)業(yè)幫助，匯集近二十年，千萬(wàn)個(gè)血清用戶(hù)細胞培養經(jīng)驗，為各種細胞培養提供問(wèn)題梳理分析，解決方案參考。