細胞治療項目，如何挑選『支原體檢測』試劑盒？

支原體檢測方法

理論上，檢測細胞或相關(guān)培養產(chǎn)品中，是否含有支原體的方法有很多，染色法、培養法、核酸法、ELISA法等，各有其優(yōu)缺點(diǎn)。

干細胞治療項目、免疫細胞治療項目、CAR-T項目、抗體藥生產(chǎn)、疫苗生產(chǎn)，另外還有一些重要的細胞培養，例如細胞典藏項目登，都需要對培養的細胞或收獲的產(chǎn)物，完成準確的支原體檢測，以確保產(chǎn)物沒(méi)有支原體污染。

一般來(lái)說(shuō)，需要檢測方法應具備以下特點(diǎn)：

（1）?結果準確

（2）最好還操作簡(jiǎn)便，出結果快

（3）需要時(shí)，還需有方法驗證，符合國際或國內《藥典》的要求。

因此，綜合考慮，核酸法支原體檢測，成為更多實(shí)驗人員的選擇。

核酸法檢測支原體，推薦使用商品化的檢測試劑盒，經(jīng)過(guò)市場(chǎng)考驗，結果更穩定。

支原體核酸法

檢測試劑盒

以德國MB支原體檢測相關(guān)產(chǎn)品為例，簡(jiǎn)述常見(jiàn)的幾種檢測用試劑盒。

選購時(shí)，需要從自身實(shí)驗需求出發(fā)，選擇能夠實(shí)現自己實(shí)驗目標的產(chǎn)品?？偟膩?lái)說(shuō)，qPCR法更適合定量實(shí)驗；常規PCR法更適合只需定性的實(shí)驗。

一、qPCR經(jīng)典法試劑盒：

Venor® Gem qEP

①經(jīng)典法qPCR試劑盒，遵循歐洲藥典流程要求

②高特異性，一次檢測即可涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規定的9種支原體），根據序列一致性，至少可以檢測到107種支原體物種。操作簡(jiǎn)單，易于觀(guān)察。

③高靈敏度，MB公司的經(jīng)典法試劑盒檢測限可達到≤10CFU/ml。

④該試劑盒可與絕大多數、能夠檢測熒光染料 FAM 和 HEX的實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀結合使用。

二、常規PCR經(jīng)典法試劑盒

Venor® Gem Classic

①內控對照為獨立包裝，遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。

②高特異性，僅一條陽(yáng)性對照條帶，即可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種。操作簡(jiǎn)單，易于觀(guān)察。

③高靈敏度。

④歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無(wú)膽甾原體和85種支原體，與細胞和真核DNA無(wú)交叉反應。

三、常規PCR預分裝法試劑盒

Venor® GeM Advance

①內控對照已加在預混液中，無(wú)需另外配置，使用便捷。

②高特異性，僅一條陽(yáng)性對照條帶，即可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種。操作簡(jiǎn)單，易于觀(guān)察。

③高靈敏度。

④歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無(wú)膽甾原體和85種支原體。

⑤各類(lèi)試劑預先包被分裝在PCR管中，無(wú)需將預混液再進(jìn)行分裝，節約時(shí)間，減少污染。

⑥凝膠上樣緩沖液和染料已預混在反應緩沖液中。PCR反應結束后，產(chǎn)物可直接上樣到瓊脂糖凝膠上。簡(jiǎn)化操作步驟，節約時(shí)間。

四、常規PCR一步法試劑盒

Venor® GeM OneStep

①內控對照已加在預混液中，無(wú)需另外配置，使用便捷。

②高特異性，僅一條陽(yáng)性對照條帶，即可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種。

操作簡(jiǎn)單，易于觀(guān)察。

③高靈敏度，1-5拷貝/μl的支原體DNA即可檢出。

④歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無(wú)膽甾原體和85種支原體。