曾經(jīng)有學(xué)者做過(guò)統計,世界范圍內的細胞培養,細胞發(fā)生支原體污染的概率在70%以上。
支原體因其體積小,在普通光學(xué)顯微鏡下難以觀(guān)察;在自然界中存在廣泛;污染前期癥狀不明顯且對抗生素有抵抗等特點(diǎn),往往令實(shí)驗人員束手無(wú)策。
1、支原體污染對于細胞本身以及細胞實(shí)驗的影響是多方面的。比較直接的影響就是細胞狀態(tài)不佳,生長(cháng)速度慢,實(shí)驗無(wú)法推進(jìn)。
2、細胞內部的一些生理生化反應也會(huì )因支原體污染而改變:細胞內DNA、RNA及蛋白表達發(fā)生改變、細胞提前老化、加速細胞凋亡進(jìn)程等,影響實(shí)驗結果,導致實(shí)驗數據不準確,時(shí)間、經(jīng)費的浪費。
3、對于其他實(shí)驗的影響:一株污染的細胞很有可能成為實(shí)驗室的污染源,對工作區域以及培養箱和液氮罐造成污染,進(jìn)而污染其他細胞,導致其他細胞繼發(fā)性污染,實(shí)驗受影響,數據無(wú)法重復,預期結果出不來(lái)。
一般情況下,普通培養擴增的細胞,如果發(fā)現支原體污染,建議直接將被污染的細胞都丟掉,并將實(shí)驗培養環(huán)境進(jìn)行消殺處理,防止支原體卷土重來(lái)。
對于已耗費很多時(shí)間、大量擴增起來(lái)的細胞,或經(jīng)過(guò)基因轉染、體外刺激等大量工作處理過(guò)的細胞,如果發(fā)現細胞被支原體污染了,又該怎么辦?
由于前期工作量巨大,實(shí)驗人員往往不愿意丟棄已有細胞,還想做“最后的掙扎",希望可以高效地清除細胞上的支原體污染,讓實(shí)驗得以往下推進(jìn),以最終獲得準確的實(shí)驗數據。
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