支原體污染檢測的國際標準化進(jìn)展，Venor®GeM支原體檢測助力研究

核酸擴增技術(shù)（Nucleic acid amplification technique，簡(jiǎn)稱(chēng)NAT）的應用正在逐漸取代基于培養的方法，成為細胞培養中檢測支原體污染的新選擇。德國MB公司生產(chǎn)的Venor®GeM qEP 支原體檢測試劑盒就是應用了NAT方法中的qPCR方法。

然而，不同的支原體NAT檢測方法之間，如檢測限和定量特性等，差異較大。為了協(xié)調支原體NAT檢測方法，生物參考材料的使用顯得尤為重要。為此，國際性可行性研究進(jìn)行了多方參與的努力，涉及21個(gè)實(shí)驗室，采用26種定性、半定量或定量設計的NAT檢測方法，分析了四種遠緣相關(guān)的支原體物種（包括Acholeplasma laidlawii，Mycoplasma fermentans，M. orale，M. pneumoniae）的凍干制劑，并在不同濃度下進(jìn)行了測試。

在一項研究中，發(fā)現使用M. fermentans制劑作為通用參考材料，可以有效降低試劑間的變異。于是，在進(jìn)一步的可比性研究中，對該制劑進(jìn)行了再生產(chǎn)和詳細的表征，并確認了其在不同NAT方法下的效價(jià)，以NAT可檢測單位（IU/ml）來(lái)表示。經(jīng)過(guò)世界衛生組織（WHO）生物標準化專(zhuān)家委員會(huì )（ECBS）的認證，該制劑被正式確定為“第一個(gè)世界衛生組織國際標準，用于基于核酸擴增技術(shù)的通用支原體檢測"（WHO Tech Rep Ser 987:42, 2014），其效價(jià)為200,000 IU/ml。

相關(guān)研究發(fā)表在《Appl Environ Microbiol》上，文章標題為：“World Health Organization International Standard To Harmonize Assays for Detection of Mycoplasma DNA"。

目前，這一世界衛生組織國際標準已經(jīng)成為支原體NAT檢測方法的重要參考制劑。它不僅可用于評估NAT檢測方法的分析靈敏度，還可用于定量檢測方法的單位化校準，并對支原體檢測領(lǐng)域的監管要求進(jìn)行規定。這標志著(zhù)支原體污染檢測在國際標準化方面取得了重要進(jìn)展，將為該領(lǐng)域的研究和應用提供更加統一和可靠的基準，進(jìn)一步促進(jìn)細胞治療產(chǎn)品的安全和有效應用。