細胞治療項目中，支原體檢測的必要性

細胞治療是用具有活性細胞制劑為主要成分來(lái)治療或預防疾病的技術(shù)，細胞治療領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)是干細胞和免疫細胞，應用這些技術(shù)，需要遵照相應的法律、法規與行政管理規定，其細胞來(lái)源、生產(chǎn)工藝和臨床應用過(guò)程進(jìn)行污染物的監控與檢測。

當細胞受到支原體污染初期，通常難以觀(guān)察到細胞的生長(cháng)和形態(tài)方面的明顯變化。然而，如果支原體污染嚴重，會(huì )導致細胞生長(cháng)速度減緩，并在細胞之間形成膜片狀的附著(zhù)結構。此外，支原體的存在會(huì )抑制宿主細胞的核酸蛋白合成，影響細胞內一些重要酶和細胞因子的正常功能。這些影響最終會(huì )導致細胞增殖受到抑制，甚至停止，導致細胞碎片逐漸增多，最終導致細胞死亡。

不僅如此，如果細胞或者細胞產(chǎn)物被支原體污染，一旦此類(lèi)藥物用于臨床，將造成不可挽回的后果。因此，在細胞治療項目中，需要對是否存在支原體污染進(jìn)行檢測。常用的方法為qPCR的方法。

支原體熒光定量PCR法（qPCR）：是在常規PCR基礎上，將『針對支原體特異性保守序列的探針』做熒光標記，使PCR擴增后的產(chǎn)物帶有熒光，利用熒光信號的變化和配套軟件，進(jìn)行DNA擴增反應的實(shí)時(shí)監測，簡(jiǎn)稱(chēng)qPCR。該方法的優(yōu)點(diǎn)：

①靈敏度高、特異性強。

②時(shí)間短，2-3小時(shí)出結果

③檢測結果可定量

④操作簡(jiǎn)便

德國MB公司生產(chǎn)的支原體qPCR檢測試劑盒（均為探針?lè )z測），依據操作步驟的細微差別， 分『經(jīng)典法』和『一步法』兩種。  

此兩類(lèi)試劑盒較全球其他廠(chǎng)家同類(lèi)產(chǎn)品，具有以下優(yōu)點(diǎn)：

①經(jīng)典法qPCR試劑盒遵循歐洲藥典流程要求

②高特異性，一次檢測即可涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規定的9種支原體），根據序列一致性，至少可以檢測到107種支原體物種。操作簡(jiǎn)單，易于觀(guān)察（使用MB的試劑盒，下表中列出的支原體物種均為陽(yáng)性，其他微生物或真核細胞均為陰性，無(wú)交叉反應）。