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如何通過(guò)實(shí)驗判斷血清是否符合實(shí)驗需求?貼壁效應可供參考

更新時(shí)間:2023-10-14  |  點(diǎn)擊率:315

是細胞培養中重要的天然培養基,含有豐富的細胞生長(cháng)必須的營(yíng)養成份,常用于動(dòng)物細胞的體外培養。實(shí)驗中較為常用的是牛血清。根據血液來(lái)源的不同,牛血清可分為:胎牛血清,新生牛血清,小牛血清,成牛血清等。

【胎牛血清】(Foetal Bovine Serum,簡(jiǎn)稱(chēng)FBS):是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長(cháng)分化階段,血中含有豐富的生長(cháng)發(fā)育因子,非常適合各種細胞的培養,一旦胚胎發(fā)育結束這些因子自動(dòng)消失。因此8個(gè)月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來(lái)使用。

【新生牛血清】(Newborn Calf Serum,簡(jiǎn)稱(chēng)NBCS):0—7天內(也有說(shuō)法是0—30天內);

【小牛血清】(Calf Serum):采自出生30——1年的小牛。

【成牛血清】(Adult Bovine Serum,簡(jiǎn)稱(chēng)ABS):采自成年牛收全血后分離得到血清。

血清在細胞培養過(guò)程中的作用,可大致歸為以下幾點(diǎn):

1.提供對維持細胞指數生長(cháng)的激素,基礎培養基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養物,以及主要的低分子營(yíng)養物。

2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結合或調節它們所結合的物質(zhì)活力。

3.有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合,起到解毒作用。

4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質(zhì)上所需因子來(lái)源。

5.起酸堿度緩沖液作用。

6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。

7.參與細胞凍存。

 

是許多重組蛋白及藥物生產(chǎn)和研發(fā)用細胞培養基中的關(guān)鍵成分,對細胞生長(cháng)的需要仍難以大規模的用其它物質(zhì)所代替。研究表明,細胞通過(guò)其粘附蛋白包括纖維連接蛋白(Fibronectin,Fn)和體外連接蛋白(Vitronectin,Vn)吸附在人工材料的培養皿上。不同比例的白蛋白和胎牛血清混合溶液等復雜介質(zhì)對FnVn通過(guò)培養皿表面自組裝單分子膜對細胞粘附的作用有較大差異。不同胎牛血清的細胞粘附相關(guān)因子之間的差異所致,胎牛血清的細胞粘附效應可能是影響貼壁細胞生長(cháng)、分化、繁殖及凋亡等生命活動(dòng)的關(guān)鍵因素。

 

因此實(shí)驗室中,可以通過(guò)對比添加不同血清的的培養液,對于細胞貼壁的促進(jìn)作用,來(lái)初步判斷血清是否符合實(shí)驗需要。在實(shí)驗過(guò)程中,可以用貼壁的細胞密度,作為評判標準。


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