細胞培養指南，這個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)千萬(wàn)要注意！

細胞培養實(shí)驗是一項基礎但十分重要的技術(shù)。幫助科研人員再生物學(xué)、醫學(xué)和藥物開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域，實(shí)現探索生物學(xué)機理、藥物篩選、開(kāi)發(fā)治療方法等目的，并為基礎科學(xué)和臨床應用提供關(guān)鍵數據，幫助于我們更深入地了解生命過(guò)程，推動(dòng)醫學(xué)和生物科學(xué)領(lǐng)域的進(jìn)步。

在細胞培養實(shí)驗中，除了可靠的實(shí)驗方案、嚴格無(wú)菌的環(huán)境以及規范合理的實(shí)驗操作，還有一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)，重要但容易被忽視——高品質(zhì)的實(shí)驗試劑?！扒蓩D難為無(wú)米之炊"，實(shí)驗試劑選擇的好與壞，直接關(guān)系到實(shí)驗結果的成敗。其中，胎牛血清作為“細胞糧食"的主要提供者，在細胞培養中扮演著(zhù)重要的角色。

胎牛血清提供對維持細胞指數生長(cháng)的營(yíng)養物；提供結合蛋白，來(lái)識別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等，能結合或調節它們所結合的物質(zhì)活力；結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合，起到解毒作用；參與細胞貼壁；提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害；參與細胞凍存。

因此細胞實(shí)驗過(guò)程中，需要挑選高品質(zhì)的胎牛血清，來(lái)保障實(shí)驗能夠順利進(jìn)行。在選擇胎牛血清時(shí)，有以下幾個(gè)注意事項：

1、胎牛血清的內毒素含量

在挑選血清時(shí)，應關(guān)注內毒素含量的高低。內毒素含量高，容易引起細胞衰老、凋亡等情況，品質(zhì)高的的胎牛血清，內毒素應該是非常低的。因此，內毒素可作為胎牛血清等級評判標準之一，內毒素含量越低的胎牛血清，級別就越高：

內毒素含量≤10EU/ml時(shí)，為特級胎牛血清；

內毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml時(shí)，為優(yōu)級胎牛血清；

內毒素含量≥ 25EU/ml時(shí)，為標準級胎牛血清。

目前，由于同一廠(chǎng)家，不同批次的血清，內毒素數值也可能有較大差異，因此很多血清廠(chǎng)家在名稱(chēng)上已不注明級別。但使用者仍可通過(guò)檢測報告，自行甄別挑選。

2、胎牛血清的血源

澳洲作為無(wú)疫產(chǎn)區，環(huán)境更為純凈，抗生素等藥物的使用管理也較為嚴格，因此，澳洲血源的胎牛血清，更受科研人員的偏愛(ài)。

合格的胎牛血清通常來(lái)自符合當地畜牧部門(mén)相關(guān)規定的的養殖場(chǎng)和屠宰場(chǎng)，采用非侵入性或較小侵入性的采集方法。這樣可以盡可能維持血源的潔凈度，減少外部污染物的影響。

3、胎牛血清應通過(guò)病原相關(guān)檢測

細胞培養的成功與安全性密切相關(guān)，而工藝精良的胎牛血清生產(chǎn)技術(shù)，可以在生產(chǎn)層面，避免胎牛血清被各類(lèi)病原微生物污染。在選擇胎牛血清時(shí)，科研人員往往無(wú)法直接進(jìn)入生產(chǎn)廠(chǎng)家，了解具體的生產(chǎn)過(guò)程，因此，應重點(diǎn)關(guān)注檢測報告中的“無(wú)菌檢測"、“病毒檢測"“病毒抗體"等相關(guān)項目，選擇無(wú)病原污染的的胎牛血清。

以科研人員常用的，Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清為例。該品牌的胎牛血清為澳洲血源，生產(chǎn)過(guò)程經(jīng)過(guò)7次無(wú)菌過(guò)濾，最后3次為0.1μm濾膜無(wú)菌過(guò)濾。

為了最終驗證胎牛血清的無(wú)菌性，Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清還經(jīng)過(guò)嚴格的病原體檢測，在供應商提供的檢測報告中，涉及有關(guān)病毒、細菌、真菌和支原體等，病原體和微生物的篩查檢測項目，檢測結果均為“未檢出"，相應病毒的抗體檢測各類(lèi)蛋白也應呈現“未檢出"的結果，確保胎牛血清的無(wú)菌性。另外，Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清的內毒素含量也非常低，控制在3EU/ml以下，有些批次甚至 ≤ 1EU/mL，讓細胞更加健康地生長(cháng)繁殖。

4、胎牛血清的蛋白含量

總蛋白含量：胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml，數值偏高，可能說(shuō)明采血的牛齡偏大，不是胎牛；數值偏低，表明血清可能摻入水或者其他溶劑。

血紅蛋白含量：標準為不高于20mg/dl。

免疫球蛋白：免疫球蛋白的數值能側面反映出采血的時(shí)的牛齡情況，新生牛血清中容易檢出IgM，IgG的含量也偏高，胎牛血清，不含IgM，IgG的含量也較低。

需要注意的是，在檢測規范允許的范圍內，同一品牌，不同批次的胎牛血清，各類(lèi)蛋白含量可能略有差異，如果實(shí)驗中，對某些蛋白有特殊的需求，需要關(guān)注胎牛血清的檢測報告，對不同批次的血清進(jìn)行選擇。

因此盡量選擇能提供多批次平行試用的品牌，經(jīng)過(guò)對比篩選，Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清脫穎而出。同時(shí)儲備多個(gè)批次，供使用人員試用，選擇更適合自身實(shí)驗需求的胎牛血清，試用結果滿(mǎn)意再進(jìn)行大批量訂購，更加省時(shí)省力省心。

綜上所述，在選擇胎牛血清時(shí)，應重點(diǎn)關(guān)注胎牛血清的內毒素含量、血源、無(wú)菌及病原檢測、蛋白含量等指標，選擇更適合自身細胞實(shí)驗的產(chǎn)品。