Wnt合成分泌和配體信號的分子機制，胎牛血清助力生物學(xué)研究

細胞信號轉導，是細胞生物學(xué)研究的重要方向，需要以細胞培養為基礎。Ausbian進(jìn)口胎牛血清，澳洲血源，內毒素含量≤3EU/ml，助力細胞學(xué)研究。

Wnt信號是一個(gè)基本的信號級聯(lián)，在人類(lèi)發(fā)育和發(fā)育中起著(zhù)至關(guān)重要的作用。異常的Wnt信號經(jīng)常與各種癌癥密切相關(guān)。Wnt信號是由分泌的脂質(zhì)修飾信號糖蛋白Wnt與其卷曲(FZD)受體及其共受體之間的相互作用觸發(fā)的。 Wnt在內質(zhì)網(wǎng)(ER)中合成，內質(zhì)網(wǎng)內的膜結合o-?；D移酶Porcupine (PORCN)將單不飽和棕櫚油酸酯部分(PAM)轉移到Wnt蛋白發(fā)夾2上的保守絲氨酸殘基上。先前的一項研究表明，棕櫚?；瘜τ?span>Wnt的分泌是很重要的，關(guān)鍵絲氨酸的突變或PORCN活性的喪失都會(huì )導致Wnt滯留在ER中。脂化后，膜蛋白Wntless (WLS)利用其胞外結構域和跨膜區域與修飾的Wnt結合。這種相互作用促進(jìn)了Wnt在細胞內的運輸。

已經(jīng)鑒定出19種人類(lèi)Wnt配體通過(guò)旁分泌和自分泌系統激活不同的信號通路人類(lèi)Wnt蛋白含有至少22個(gè)半胱氨酸殘基，這些殘基形成多個(gè)二硫鍵，有助于Wnt的穩定性和折疊。脂化Wnt配體由于其疏水性，通常在水環(huán)境中表現出低溶解度，因此在Wnt生產(chǎn)過(guò)程中需要蛋白質(zhì)伴侶。在所有后生動(dòng)物中，Wnt脂化和細胞內轉運的關(guān)鍵過(guò)程分別由PORCN和WLS兩種膜蛋白介導。這意味著(zhù)存在一個(gè)支配Wnt生產(chǎn)的普遍原則。

Wnt分泌的一種可能模式涉及直接釋放到細胞外空間。

首先，Wnt-WLS復合物通過(guò)高爾基體從內質(zhì)網(wǎng)移動(dòng)到質(zhì)膜。一旦Wnt- wls復合物到達細胞表面，Wnt分子就與排泄它們的細胞上的受體結合(自分泌信號)或與鄰近細胞結合(旁分泌信號)。這一過(guò)程可能涉及Wnt分子向各種實(shí)體的轉移，如細胞表面蛋白聚糖和可溶性轉運蛋白。

另一種模型表明，Wnt-WLS復合物在定位到質(zhì)膜后，經(jīng)歷內吞作用和隨后在內體腔室內解離。這就允許Wnt被裝載到外泌體上進(jìn)行分泌關(guān)于Wnt與WLS解離的各種假設提出，低pH調節Wnt的釋放，特定脂質(zhì)與Wnt在WLS中的棕櫚油基部分競爭，或者膜曲率的改變促進(jìn)了Wnt的釋放。

然而，有限的實(shí)驗證據支持這些提出的機制；因此，Wnt從WLS釋放的分子決定因素仍然難以捉摸。

近日，科研人員發(fā)現鈣網(wǎng)蛋白(CALR)是內質(zhì)網(wǎng)中Wnt蛋白的糖聚糖伴侶。

相關(guān)研究發(fā)表在《Cell》上，文章標題為：“Molecular basis of Wnt biogenesis, secretion and Wnt7 specific signaling"。

研究結果還表明，將磷脂摻入WLS可以增強Wnt蛋白的募集。在WLS載脂蛋白狀態(tài)下，TMs 6-7的構象發(fā)生改變，阻斷了WLS和Wnt蛋白中中心磷脂的結合位點(diǎn)，提示脂質(zhì)介導Wnt釋放的機制。此外，我們已經(jīng)確定了與Wnt7a結合的RECK的結構，揭示了RECK的CC4結構域對于結合Wnt7a激活Wnt配體特異性信號至關(guān)重要。