如何讓支原體遠離你的細胞
據粗略估計,大約三分之一的細胞培養物都感染了支原體。這些小東西神不知鬼不覺(jué),侵入你的細胞。由于它們體積小,生長(cháng)緩慢,所以難以察覺(jué)。但是,它們的存在又確實(shí)改變了細胞的代謝過(guò)程,繼而干擾你的實(shí)驗結果,或造成無(wú)法解釋的差異。更糟的是,拯救被感染的細胞幾乎是不可能的任務(wù)。因此,就支原體污染而言,預防是**要務(wù)。
細胞來(lái)源是關(guān)鍵
支原體污染的*常見(jiàn)原因之一是引入的培養物已經(jīng)被感染。一旦進(jìn)入實(shí)驗室,這些小東西會(huì )蔓延到每個(gè)角落,讓你崩潰。要避免這種情況,*簡(jiǎn)單的辦法就是不從其他實(shí)驗室要細胞,而從供應商或菌種保藏中心(ATCC或ECACC)購買(mǎi),這些細胞經(jīng)過(guò)嚴格檢測,確保不含有支原體。
如果購買(mǎi)有難度,或基于其他原因,不得不使用其他實(shí)驗室的細胞,那么也要保持警惕,在單獨的培養箱中隔離,同時(shí)進(jìn)行支原體的檢測。市場(chǎng)上有多家公司提供支原體檢測試劑盒,你可自行選擇。
定期檢測很重要
即使實(shí)驗室沒(méi)有新來(lái)的細胞,支原體也可能通過(guò)操作人員傳遞到現有的培養物。當然,操作人員并不知道。支原體污染的另一條路線(xiàn)是通過(guò)你的細胞培養試劑。培養基、酶這些常用試劑,也有可能被支原體污染。
盡管無(wú)法避免人或試劑的污染,但常規檢測也能避免情況惡化。也許,當支原體初次感染時(shí),我們未必能檢測到,但盡早發(fā)現,就能防止這種微生物的傳播,避免大的損失。
支原體檢測有很多種。直接培養方法雖然準確率高,但需要三到四周的時(shí)間。因此,我們在常規檢測中使用間接檢測方法已足夠,若發(fā)現陽(yáng)性,則后續可采用較為繁瑣的直接檢測。常見(jiàn)的間接檢測方法有基于酶活性的熒光和生化分析、PCR分析、**分析等。
無(wú)菌操作要做好
支原體污染的另一個(gè)主要源頭是無(wú)菌操作不佳。盡管良好的操作可能是*簡(jiǎn)單的預防措施,但說(shuō)起來(lái)容易,做起來(lái)難。每個(gè)人都會(huì )犯錯,特別是在重復勞動(dòng)時(shí)。因此,實(shí)驗室應不定期開(kāi)展培訓和監督,以便讓每個(gè)人都充分認識到支原體的破壞性。
許多實(shí)驗室目前仍使用***,但細胞培養人員逐漸認識到這是不負責任的,因為它帶來(lái)了耐藥微生物的問(wèn)題。相反,*好依賴(lài)自身的無(wú)菌操作來(lái)預防支原體,而只有在懷疑或確認感染的時(shí)候才使用***。