肌苷誘導CAR-T細胞的干性特征并增強效力，德國MB助力科研

細胞治療項目需要進(jìn)行支原體檢測，并且根據藥典要求，通過(guò)方法學(xué)驗證，德國MB支原體qPCR檢測試劑盒，通過(guò)歐洲藥典和日本藥典的方法學(xué)驗證

腺苷(Ado)是一種免疫抑制核苷，有助于腫瘤微環(huán)境(TME)的免疫逃避。CD39(外ATP二磷酸水解酶-1,ENTPD-1)和CD73(5′-外核苷酸酶，NT5E)將ATP代謝為Ado, Ado主要通過(guò)A2aR信號介導免疫抑制小鼠CD4+ treg共表達CD39和CD73，部分通過(guò)產(chǎn)生ado介導免疫抑制。在人類(lèi)中，大多數treg表達CD39，而CD73的表達可由缺氧誘導因子1- α (HIF1a)誘導。在TME中，腫瘤反應性T細胞富集于CD39+亞群。盡管一些研究將改善預后與更高數量的CD39+腫瘤浸潤淋巴細胞相關(guān)聯(lián)，但功能研究表明，CD39標志著(zhù)功能失調、耗竭的T細胞。

嵌合抗原受體(CARs)將細胞外抗原結合域連接到細胞內信號域，從而實(shí)現mhc不依賴(lài)的抗原特異性T細胞反應CAR-T細胞對難治性B細胞惡性腫瘤非常有效，但對實(shí)體瘤的作用較弱，耗盡是限制CAR-T細胞效力的主要因素。

在這里，探討了CD39的生物學(xué)特性和Ado在耗盡的人類(lèi)T細胞功能障礙中的作用，并試圖通過(guò)工程腺苷抵抗來(lái)增強CAR-T細胞的效力。通過(guò)體外人類(lèi)CAR-T細胞衰竭模型，我們觀(guān)察到耗盡的CD8+CD39+ T細胞共表達CD73，產(chǎn)生Ado，并通過(guò)A2aR介導Ado相關(guān)的抑制。為了誘導Ado抗性，科研人員敲除了CD39、CD73或A2aR，但只觀(guān)察到適度的表型和轉錄變化。相反，將Ado代謝為肌苷(INO)的膜系鏈腺苷脫氨酶(ADA)的過(guò)表達顯著(zhù)改變了CAR-T細胞的干細胞轉錄組，增強了CAR-T細胞的適應性。同樣，CAR-T細胞暴露于INO誘導了干細胞相關(guān)基因表達程序并增強了CAR-T細胞的功能。

單細胞分析顯示，INO重編程代謝組，減少糖酵解，但增加谷氨酰胺解，多胺合成和氧化磷酸化。這些影響與向莖稈方向的表觀(guān)遺傳重編程有關(guān)。臨床規模生產(chǎn)使用ino補充培養基產(chǎn)生的CAR-T細胞產(chǎn)品符合臨床劑量標準，在動(dòng)物模型中顯示出增強的效力。這些數據確定了INO是CAR-T細胞干細胞的誘導劑，并提供了營(yíng)養調節可以驅動(dòng)調節T細胞分化和增強T細胞適應性的表觀(guān)遺傳變化的證據。