合成人工染色體的研究新進(jìn)展，Lab Clean助力分子生物學(xué)研究

污染的DNA、RNA和DNA酶、RNA酶對于采用高靈敏PCR技術(shù)的實(shí)驗室來(lái)說(shuō)，并非小問(wèn)題。最初來(lái)自氣溶膠的DNA和RNA片段，可導致樣品間的交叉污染，造成結果不準確和假陽(yáng)性。然而，來(lái)自樣品、PCR管、吸頭、移液器和設備的DNA和RNA沒(méi)有得到重視，直到在PCR中發(fā)現污染。因此，有必要采用有效的Lab Clean™，對實(shí)驗室設備、任何表面和地面進(jìn)行清潔，以避免污染擴散，以獲得可靠的實(shí)驗結果。

長(cháng)期以來(lái)，細菌和酵母中的人工染色體一直是合成生物學(xué)家用來(lái)編寫(xiě)和重寫(xiě)基因組的載體。哺乳動(dòng)物系統受限于有限的染色體工具。在人類(lèi)人工染色體(HACs)被開(kāi)發(fā)出來(lái)的四分之一個(gè)世紀之后，科研人員開(kāi)發(fā)了一種不受控制的多聚化的解決方案，這種解決方案伴隨著(zhù)先前的版本。它們的HAC約為750千堿基，比以前的HAC大得多，足以容納通過(guò)細胞分裂遺傳所需的著(zhù)絲粒上的多域染色質(zhì)。隨著(zhù)細胞傳遞方法的簡(jiǎn)化，這些發(fā)展為推進(jìn)哺乳動(dòng)物和許多其他真核生物的染色體工程提供了手段。

相關(guān)研究發(fā)表在《Nature》上，文章標題為：“Efficient formation of single-copy human artificial chromosomes"。

大型DNA組裝方法是合成原核生物和芽殖酵母染色體的里程碑式成就的基礎。出芽酵母通過(guò)約125堿基對DNA序列定義的著(zhù)絲?？刂迫旧w遺傳，而哺乳動(dòng)物和許多其他真核生物則使用較大的表觀(guān)遺傳著(zhù)絲粒。利用著(zhù)絲粒表觀(guān)遺傳學(xué)允許人類(lèi)人工染色體(HAC)的形成，但不足以避免初始DNA分子在引入細胞后猖獗的多聚化。我們描述了一種有效地形成單副本HACs的方法。它采用了一個(gè)約750千堿基的結構，這個(gè)結構足夠大，可以容納存在于內部和外部著(zhù)絲粒上的不同染色質(zhì)類(lèi)型，從而避免了多聚化的需要。通過(guò)使用酵母球質(zhì)體融合，使哺乳動(dòng)物細胞的遞送流線(xiàn)型。這些進(jìn)展允許在后生動(dòng)物細胞的背景下進(jìn)行忠實(shí)的染色體工程。