維生素測定培養基生產(chǎn)和使用容易遇到的問(wèn)題

　　

　　微生物法測定食品中的維生素B12、葉酸是國家食品安全標準中的方法。因其檢出限低、靈敏度高、測定結果準確可靠，受到了國內的廣泛青睞。在該方法中要用到三種培養基：貯存菌用培養基、接種菌用培養基、維生素測定用培養基。其中維生素測定用培養基重要，也為關(guān)鍵。

　　

　　鑒別培養基在培養基中加入某種試劑或化學(xué)藥品，使難以區分的微生物經(jīng)培養后呈現出明顯差別，因而有助開(kāi)快速鑒別某種微生物。這樣的培養基稱(chēng)之為鑒別培養基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍培養基就是一種常用的鑒別性培養基。半固體培養基指在液體培養基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養基。脫水培養基又稱(chēng)預制干燥培養基，指含有除水分外的一切成分的商品培養基。

　　

　　維生素測定培養基生產(chǎn)和使用常見(jiàn)問(wèn)題：

　　

　　1.維生素測定培養基能用肉眼判斷其pH值嗎？

　　

　　答：維生素測定培養基中酚紅的含量與普通培養基中的酚紅含量不同，不能通過(guò)肉眼觀(guān)察或通過(guò)經(jīng)驗來(lái)判定pH值，建議使用pH計進(jìn)行測定。

　　

　　2.維生素測定培養基的緩沖系統是什么？

　　

　　答：平衡鹽一般是由無(wú)機鹽及葡萄糖組成的。平衡鹽有Hanks′系統、Earle′s系統、Dulbecco′s磷酸緩沖鹽系統等。

　　

　　3.谷氨酰胺溶液和碳酸氫鈉的配制方法是什么？

　　

　　答：以0.2mol/L的L-谷氨酰胺配制為例：稱(chēng)取L-谷氨酰胺2.92g，加注射用水100ml，充分攪拌混勻。用0.2μm濾膜正壓過(guò)濾除菌。溶液應在4℃下避光保存，2周內使用。

　　

　　以7.5%NaHCO3的配制為例：稱(chēng)取NaHCO37.5g溶于100ml蒸餾水中過(guò)濾除菌。

　　

　　4.什么培養基中可以省去加酚紅？

　　

　　答：酚紅在培養基中用作pH值的指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。酚紅本身對生物制品質(zhì)量并不會(huì )產(chǎn)生影響，可以通過(guò)純化技術(shù)去除，但酚紅在無(wú)血清培養基可能帶來(lái)胞內鈉/鉀失衡，影響細胞生長(cháng)，當然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養基中必需的一種成分，很多國外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過(guò)程中都使用無(wú)酚紅培養基。