讀懂Biocoll細胞分離液主要特點(diǎn)及使用須知

　　特點(diǎn)：

　　1、提供多種密度的Biocoll細胞分離液，可分離外周血，骨髓和臍帶血中的單個(gè)核細胞，低密度的基質(zhì)細胞，間充質(zhì)干細胞以及嚙齒動(dòng)物的血細胞等。

　　2、生產(chǎn)過(guò)程符合GMP以及美國藥典標準，無(wú)菌即用，內毒素含量低。

　　3、分離效果好，所得細胞活性>80%,Ficoll可高壓滅菌，有效期長(cháng)。

　　應注意如下事項

　　分離方法會(huì )影響胰島的產(chǎn)率和存活率，因此，取材時(shí)需要注意

　　1.胰臟應快速取材，保持包膜完整。

　　2.建議采用UW溶液運輸。

　　3.對胰臟進(jìn)行評估，在消化酶灌注前去除多余的脂肪和殘留的十二指腸和脾臟。

　　4.消化過(guò)程不宜進(jìn)行震蕩，以保證胰腺組織被灌注的消化酶液消化，而不是被胰腺所釋放的胰蛋白酶消化。

　　5.要保證胰島的包膜完整，消化不能太充分。寧可不足，也不可過(guò)頭，否則會(huì )影響胰島純化的產(chǎn)率。

　　1.分別將7mL和10mL

　　Biocoll細胞分離液（D=1.077g/mL,20℃）放入15mL和25mL的離心管中。

　　2.將肝素化抗凝全血（50U/mL肝素,無(wú)穩定劑）與等體積培養基混合均勻，小心添加在分離液的液面上。

　　3.1200g離心20min。用巴斯德吸管吸?。?0-100%）淋巴細胞富集層（位于血漿和Biocoll之間），加入培養基中洗2次，*300g離心10min.*200g離心10min，即得所需淋巴細胞，可以按常規方法進(jìn)行細胞計數等實(shí)驗。