如何準備用于生長(cháng)促進(jìn)曲線(xiàn)測定的細胞

　　要進(jìn)行細胞生長(cháng)曲線(xiàn)的測定，來(lái)反映FBS的功能，需要先準備足夠的有活力的細胞。締一生物/締一生物根據美國藥典（USP）的描述分析如何準備用于生長(cháng)促進(jìn)曲線(xiàn)測定的細胞。

　　用37℃水浴快速解凍一管FBS。計數細胞并觀(guān)察活力。用添加FBS的*培養基在37℃培養細胞，具體遵循ATCC對相應細胞提供的指導。鏡下觀(guān)察，保證細胞均一分布，貼壁或懸浮接近長(cháng)滿(mǎn)。細胞再傳代，直至培養的細胞數足夠用于檢測（總細胞數需要1X107個(gè)，活力大于90%）。

　　收獲細胞時(shí)，先棄掉上清，用不含FBS的培養基沖洗；對貼壁細胞，加1 mL of Trypsin/EDTA消化，必要時(shí)用1ml不低于10%FBS的培養基中和。離心，棄上清，細胞重懸。此時(shí)，細胞即可用于接種。

　　接種細胞時(shí)，應測試*的接種密度，起始密度范圍為2×103~2×104活細胞/mL。選取至少5個(gè)時(shí)間點(diǎn)，3個(gè)復孔，以確定細胞*接種密度。在37℃，5%CO2的培養箱孵育。對7天內的每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的培養細胞進(jìn)行拍照（第0,1,2,3,4,7天）。應采用待測試的血清和USP的參考血清，測試三種血清濃度。記錄下每種條件下細胞的匯合度。在預定的時(shí)間點(diǎn)上收獲細胞。對細胞總數和活力進(jìn)行計數。

　　綜上所述，您是不是已經(jīng)對如何準備用于生長(cháng)促進(jìn)曲線(xiàn)測定的細胞，有所了解。如果還有其他疑問(wèn)，請咨詢(xún)締一生物/締一生物資深專(zhuān)家。