微生物法測定泛酸的方法步驟

泛酸是輔酶A（CoA）和?；d體蛋白（ACP）生物合成的重要前體物質(zhì)，參與人體中類(lèi)固醇、褪黑激素、抗體和亞鐵血紅素的合成，是維持生命正常生理機能的必需小分子有機物，也是嬰幼兒乳粉中重要的營(yíng)養物質(zhì)。

目前的兩種方法——微生物法和液相色譜法都可以用于檢測奶粉等嬰幼兒食品中的泛酸，結果具有可比性。微生物法法測定泛酸含量靈敏度高，其標準曲線(xiàn)相關(guān)系數、回收率和相對標準偏差方面，檢測結果都較好。而液相色譜法的檢測速度較慢、成本較高，所以采用微生物法進(jìn)行大量樣本的測定，被美國AOAC所推薦，也是我國國家標準檢驗方法的仲裁法。

但該方法操作步驟較多，微生物生長(cháng)的不確定性強也會(huì )影響結果。注意這些可能存在的影響因素，可以保證測量結果的穩定和準確。有人研究發(fā)現，對泛酸檢驗結果影響zui大的是試樣前處理（存在泛酸損失）及稀釋（包括容量瓶、吸量管、量筒等玻璃器具的校準和室溫對液體體積的影響），其次是標準溶液的配制。另一項研究則發(fā)現，是微生物因素引起的吸光度曲線(xiàn)偏離線(xiàn)性影響zui大，因此建議在日常監測中，減少微生物培養環(huán)境因素的波動(dòng)，對培養環(huán)境實(shí)時(shí)更嚴格的控制。

關(guān)于微生物法測泛酸的精密度，有人對14個(gè)嬰兒配方奶粉的泛酸含量進(jìn)行了測定，進(jìn)行了28次相對誤差和20次回收率的觀(guān)察，發(fā)現75%的結果相對誤差都<10%，回收率有80%在90~110%之間，說(shuō)明該方法用于檢測奶基嬰幼兒食品是可行的。

又有研究發(fā)現，標準曲線(xiàn)在0~50ng/ml范圍內，線(xiàn)性關(guān)系較好。同時(shí)提出幾點(diǎn)注意事項，要注意無(wú)菌操作；避免菌種污染；玻璃器皿要嚴格清洗；必要的話(huà)，樣本多做幾個(gè)稀釋度的實(shí)驗；降溫過(guò)程中，要將試管浸入冷水中，使其迅速降溫，避免沉淀和顏色產(chǎn)生；用軟件擬合4次泛酸標準曲線(xiàn)。