超級耐藥菌不動(dòng)桿菌的一種分離方法

不動(dòng)桿菌是一類(lèi)不發(fā)酵糖類(lèi)的革蘭氏陰性桿菌，不動(dòng)桿菌屬（Acinetobacter）分為7種，即醋酸鈣不動(dòng)桿菌（A. calcoaceticus）、魯菲不動(dòng)桿菌（A. lwoffi）、鮑曼不動(dòng)桿菌（A. baumanii）、溶血不動(dòng)桿菌（A. haemolytius）、瓊氏不動(dòng)桿菌（A. junii）、*不動(dòng)桿菌（A. johnsonii）和抗輻射不動(dòng)桿菌。

不動(dòng)桿菌主要存在于各類(lèi)型的感染中，對大多數常用的抗生素都有耐藥性，包括β內酰胺類(lèi)和氨基糖甙類(lèi)。不動(dòng)桿菌是條件致病菌，也是人體正常菌群的組成部分。該菌粘附力*，易在各類(lèi)醫用材料上粘附，而成為貯菌源。存在于健康人皮膚（25%）、咽部（7%），也存在于結膜、唾液、胃腸道及陰道分泌物中。感染源可以是患者自身（內源性感染），亦可以是不動(dòng)桿菌感染者或帶菌者，尤其是雙手帶菌的醫務(wù)人員。傳播途徑有接觸傳播和空氣傳播。在醫院里，污染的醫療器械及工作人員的手是重要的傳播媒介。易感者為老年患者、早產(chǎn)兒和新生兒，手術(shù)創(chuàng )傷、嚴重燒傷、氣管切開(kāi)或插管、行靜脈導管和腹膜透析者，廣譜抗菌藥物或免疫抑制劑應用者，免疫缺陷患者需要使用呼吸機，其感染的風(fēng)險更大。根據感染部位不同和病情輕重不一，可引起呼吸道感染，創(chuàng )口感染、敗血癥等。在使用呼吸機者中，肺炎發(fā)生率約為3%～5%。

臨床上檢測不動(dòng)桿菌主要是通過(guò)細菌培養。傳統分離方法在血平板和麥康凱平板上經(jīng)35℃~37℃培養18h~24h后，可形成圓形、灰白色、光滑、濕潤、邊緣整齊、直徑2~3mm的菌落，無(wú)色素形成，存在菌落與背景區分不明顯，不易分離等缺點(diǎn)，培養方法有尿液培養、痰液培養、咽部黏液培養等。當尿培養陽(yáng)性者細菌計數應＞10萬(wàn)/毫升時(shí)，判定為不動(dòng)桿菌感染；痰培養陽(yáng)性者，每個(gè)平板的不動(dòng)桿菌菌落數應在30個(gè)以上。

HiMedia公司（微生物培養基生產(chǎn)商）生產(chǎn)的HiCrome™不動(dòng)桿菌顯色培養基（貨號M1938）用于環(huán)境和臨床樣本中選擇性分離耐藥的不動(dòng)桿菌，方便快捷，顯色明顯。產(chǎn)品經(jīng)過(guò)歐盟體系認證，可用于臨床診斷。其特殊蛋白胨提供了氮源、碳源化合物、氨基酸、維生素和其他對生物體重要的生長(cháng)因子，氯化鈉可以保持滲透平衡，選擇性添加劑可以抑制革蘭氏陽(yáng)性菌生長(cháng)。培養基中的顯色混合物使目標菌菌落呈淡紫色，伴有光暈。試驗證實(shí)，多重耐藥的鮑曼不動(dòng)桿菌如ATCC BAA-1605均可被有效分離出來(lái)，而其他不耐藥的不動(dòng)桿菌生長(cháng)被抑制。ATCC BAA-1605菌株于2006年從加拿大醫院中分離，對頭孢他啶、慶大霉素、替卡西林、哌拉西林、環(huán)丙沙星等多種抗生素均有耐藥性。

HiCrome™不動(dòng)桿菌顯色培養基在配置過(guò)程中，無(wú)須高壓滅菌，在冷卻至45-50°C需加入兩管復溶的MDR選擇性添加劑（貨號FD271，成分氨芐青霉素鈉鹽和頭孢他啶）或Leeds不動(dòng)桿菌選擇性添加劑（貨號FD335）。只需在35-37°C培養24h~48h即可得到結果。該產(chǎn)品有多篇引用文獻，如2017年發(fā)表的印度錫金的轉診醫院對鮑曼不動(dòng)桿菌分離株β-內酰胺酶的表型分析（Uzma Rehman , Karma Gurmey Dolma , T.Shantikumar Singh. Comparative analysis of various phenotypic methods for the detection of beta-lactamase in Acinetobacter baumannii isolates from a referral hospital in Sikkim, India[J]. Indian Journal of Basic and Applied Medical Research,2017, 6(3) : 226-233）。