葉酸是乳酸桿菌生長(cháng)的必需營(yíng)養素,微生物法檢測葉酸是利用乳酸桿菌生長(cháng)速度與葉酸含量相關(guān)的原理建立的。與其他葉酸檢測的方法相比,微生物法具有許多優(yōu)點(diǎn):樣品預處理簡(jiǎn)單、對設備要求不高、成本低廉等。
許多機構都將微生物法作為葉酸分析的標準方法,我國國家標準《嬰幼兒配方食品和乳粉通用檢驗方法》中測定葉酸的方法即為微生物法。1988 年 Horrne 等應用 96 孔細胞培養板以干酪乳酸桿菌(Lactobacillias Casei)對葉酸進(jìn)行微量檢測,將甘油冷凍保存乳酸桿菌與96孔酶標板相結合,使得測定時(shí)間大為縮短。菌株對多數葉酸形式反應相似,能測定單和多谷氨酸葉酸,靈敏度很高,能達到ng 水平,具有較高的靈敏度和重現性。
這一方法對菌種的處理、分裝和保存,以及操作過(guò)程都作了重大改進(jìn),已被認為是目前可靠、簡(jiǎn)便、迅速和微量檢測葉酸的方法。
96 孔板微生物法測葉酸能夠獲得準確、可靠、重復性好的結果。稀釋倍數對測定結果影響不大,結果穩定??紤]其成本低廉,樣本預處理簡(jiǎn)單以及對設備要求不高等優(yōu)點(diǎn),適合于大批量測定,可用于大樣本的血液流行病學(xué)研究。此方法還可用于其他生物組織和食品中葉酸含量的測定,這對國內開(kāi)展葉酸檢測有著(zhù)較大的意義。
應用96孔板法測定葉酸含量時(shí),選擇測定用葉酸培養基,這里推薦的是上HiMedia公司生產(chǎn)的葉酸測定用培養基(貨號:M543),該培養基由Himedia Laboratories生產(chǎn),嚴格遵循標準,國產(chǎn)葉酸培養基含有痕量葉酸,易導致測定結果偏高,實(shí)驗準確性比較差,HiMedia葉酸測定用培養基有認證的GMP,CE和FDA,ISO9001,ISO13485等證書(shū),成分符合《GB5009.211-2014 食品安全國家標準 食品中葉酸的測定》,測定結果準確性高。