國標GB4789.4—2016 沙門(mén)氏菌檢驗操作步驟

沙門(mén)氏菌(Salmonella)為革蘭氏陰性、兩端鈍圓的短桿菌，它比大腸桿菌細, 也是腸桿菌科的一種重要的致病細菌。如果食用了被沙門(mén)氏菌污染的食品或者藥品后，將會(huì )引起中毒，導致傷寒、腸熱癥、敗血癥和胃腸炎等疾病。

根據美國疾病控制和預防中心(CDC)的統計， 每年在美國由沙門(mén)氏菌引發(fā)食源性疾病常常居于食源性疾病的前列，目前我們食品監管部門(mén)依據國標GB4789.4—2016檢測沙門(mén)氏菌，具體操作步驟如下：

1預增菌

無(wú)菌操作稱(chēng)取25g(mL)樣品，置于盛有225mLBPW 的無(wú)菌均質(zhì)杯或合適容器內，以8000r/min~10000r/min均質(zhì)1 min~2 min，或置于盛有225 mLBPW 的無(wú)菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min~2min。若樣品為液態(tài)，不需要均質(zhì)，振蕩混勻。如需調整 pH，用1 mol/mL 無(wú)菌 NaOH 或HCl調pH 至6.8±0.2。無(wú)菌操作將樣品轉至500mL錐形瓶或其他合適容器內(如均質(zhì)杯本身具有無(wú)孔蓋，可不轉移樣品)，如使用均質(zhì)袋，可直接進(jìn)行培養，于36 ℃±1 ℃培養8h~18h。

如為冷凍產(chǎn)品，應在45 ℃以下不超過(guò)15min，或2 ℃~5 ℃不超過(guò)18h解凍。

2增菌

輕輕搖動(dòng)培養過(guò)的樣品混合物，移取1mL，轉種于10mLTTB 內，于42 ℃±1 ℃培養18h~24h。

同時(shí)，另取1mL，轉種于10mL SC內，于36 ℃±1 ℃培養18h~24h。

3分離

分別用直徑3mm的接種環(huán)取增菌液1環(huán)，劃線(xiàn)接種于一個(gè)BS瓊脂平板和一個(gè) XLD瓊脂平板(或 HE瓊脂平板或沙門(mén)氏菌屬顯色培養基平板)，于36℃±1℃分別培養40h~48h(BS瓊脂平板)或18h~24h(XLD瓊脂平板、HE瓊脂平板、沙門(mén)氏菌屬顯色培養基平板)，觀(guān)察各個(gè)平板上生長(cháng)的菌落。

沙門(mén)氏菌屬顯色培養基平板，締一生物為您推薦使用HiMedia公司（微生物公司）的沙門(mén)氏菌顯色培養基(貨號：MV1296），該培養基用植物蛋白胨取代了動(dòng)物蛋白胨，安全性更高；并建立在Rambach培養基配方（2）基礎上。Rambach的配方，是基于沙門(mén)氏菌代謝丙二醇產(chǎn)酸的原理。但該培養基僅僅用顯色底物就能鑒別出沙門(mén)氏菌這一生化特性。它用于分離和鑒別沙門(mén)氏菌，與大腸菌群相區分，具有更高的敏感度。

沙門(mén)氏菌顯色培養基（貨號：MV1296）在35-37℃孵育24-48小時(shí)后觀(guān)察到的培養特征

4生化試驗

三糖鐵瓊脂和賴(lài)氨酸脫羧酶試驗、靛基質(zhì)試驗或選擇生化鑒定試劑盒或全自動(dòng)微生物生化鑒定系統進(jìn)行鑒定。推薦使用HiMedia公司沙門(mén)氏菌生化鑒定試劑盒（KB011）

沙門(mén)氏菌生化鑒定試劑盒（KB011）包含的生化鑒定反應有：

甲基紅試驗（MR） VP試驗 尿素酶 H2S產(chǎn)生 檸檬酸發(fā)酵 賴(lài)氨酸脫羧ONPG試驗

乳糖發(fā)酵 阿拉伯糖發(fā)酵 麥芽糖發(fā)酵 甘露醇發(fā)酵衛矛醇發(fā)酵

5血清學(xué)鑒定

檢查培養物有無(wú)自凝性、多價(jià)菌體抗原(O)鑒定、多價(jià)鞭毛抗原(H)鑒定、血清學(xué)分型(選做項目)

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商，在微生物培養和檢測領(lǐng)域，一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。